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南方农业学报 JOURNALsouTHERNAGRICULTuRE2012,43(8):1079—1085
ISSN2095一l191:CODENNNXAAB http:/h刑w.州fnyxb.com
DOI:10.3969/j:issn.2095—1191.2012.08.1079
籼稻GAD基因的克隆、序列分析及其
植物表达载体构建
黄志伟,许 明,林忠辉,蔡小玲,郑金贵+
滔建农林大学农产品品质研究所。福州 350002)
摘要:【目的】克隆籼稻谷氨酸脱羧酶(GAD)基因的全长cDNA,并进行序列分析和植物表达载体构建,为改良水稻
的营养保健品质奠定基础。【方法】根据已知植物GAD基因的保守区域设计引物,以高GABA籼稻品系“新一9-4”的胚芽
扩增获得长1962
bp的籼稻GAD基因全长cDNA(OsjGAD),包含1479bp的开放阅读框,编码492个氨基酸。0sjGAD与已
因分别位于此载体的两个不同T—DNA区。【结论】克隆获得的籼稻GAD基因OsjGAD长1962bp,并成功构建了其双
T—DNA植物高效表达载体。
关键词:籼稻;谷氨酸脱羧酶(GAD);1一氨基丁酸(GABA);基因克隆;序列分析;载体构建
中图分类号:S5ll;Q781 文献标志码:A
0tofGADf|romIromlndlCaindicaricerlCeandandltsits
U10nlng,SeqUenCeCloning,sequenceanalysisanalVSlSbAl一,gene2ene
Vectorconstruction
plantexpression
HUANG
Zhi—wei,XU
Ming,LINZhong—hui,CAIXiao—ling,ZHENGJin—gui+
Pmduct and
(AgriculturalQualityInstitute,FujianAgricultureForestryuniversity,Fuzhou350002,China)
current wasconductedtoclonethefull cDNAof
Abstract:【0bjective】The
experiment length dutamatedecarboxy-
from its
indica then followedtheconstmctionof vectorto
lase(GAD)generice,andanalyzesequence by plantexpression
referencesfor ricenutritionandhealthcare of
cDNAGAD f而mindica
provide improving quality.【Method】Full1en昏h gene
rice‘Xin一9—4’richinGABAwasclonedRT—PCRandRACEbasedonthe
bv speci
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