第八章 海藻酸钠的提取及部分性质的测定.docVIP

生物化学 综合性实验讲义 第一章 海藻酸钠的提取及部分性质的测定 前言：海藻酸钠（Sodium Alginate, NaAlg）是从褐藻类的海带或马尾藻中提取的一种多糖，是由β-1,4-D-甘露糖醛酸（M）和α-1,4-L-古罗糖醛酸（G）组成的一种线型聚合物，是海藻酸衍生物中的一种，所以有时也称褐藻酸钠或海带胶和海藻胶。其分子式为(C6H7O6Na)n，相对分子量在(32000-200000)。海藻酸钠中的M和G以M-嵌段、G-嵌段和MG-嵌段存在。M和G的比率及排列顺序因褐藻的种类不同而有显著的差异，即或是同一种褐藻，也因部位不同而有显著的差异。 海藻酸钠作为一种天然高分子物质以其良好的生物降解性和生物相容性，以及良好的增稠性、成膜性、稳定性、絮凝性和螯合性而被广泛应用于化学、生物、医药、食品等领域。 实验一、海藻酸钠的提取 1．目的要求: 学习并掌握钙凝离子交换法提取海藻酸钠原理及方法 2．实验原理： 目前提取海藻酸钠的方法主要有四种，分别为酸凝酸化法、钙凝酸化法、钙凝离子交换法、酶解提取法。本实验采用钙凝离子交换法。在这个方法中，首先用甲醛处理海带（或马尾藻），甲醛会使藻体的蛋白质变性而固定，并将海带色素固定在表皮细胞中，不致溶于水中导致产品色泽加深。同时，甲醛对植物细胞壁纤维组织有破坏作用有利于消化过程中海藻酸盐的置换与溶出。其次用碳酸钠（Na2CO3）进行消化，此过程可以使不溶性褐藻酸盐变成可溶性褐藻酸钠盐；当加入氯化钙后褐藻酸钠变成水不溶性褐藻酸钠盐析出这一步称为钙析；将钙析后的产品过滤后用氯化钠就可以进行离子交换脱钙。反应方程式如下： 2M(Alg)n+nNa 2M(Alg)n+nNa2CO3 2nAlgNa+M2(CO3)n 消化 2AlgNa+CaCI2Ca2Alg +2NaCI 2AlgNa+CaCI2 Ca2Alg +2NaCI 2AlgNa+CaCI2Ca 2AlgNa+CaCI2 Ca2Alg +2NaCI 脱钙后褐藻酸钙就又变成褐藻酸钠溶解在溶液中，通过乙醇就可以将褐藻酸钠沉淀出来。 3．实验材料： 1)材料 海带 2)试剂 甲醛 1% 碳酸钠 3% 浓盐酸 氯化钠 10% 氯化钙 95%乙醇 3)仪器 电热恒温水浴锅 全塑不锈钢循环水真空泵 恒温箱托盘天平 4．实验方法与步骤: 4.1 浸泡：称取5g剪细至0.5cm的海带于500ml的烧杯中，加入300ml水，并加适量的甲醛，使甲醛溶液初始浓度为1%，浸泡4小时。浸泡结束后，洗涤。 4.2 消化：加入3%Na2CO3300ml消化3个小时。 4.3 过滤：由于消化后，海带变成了糊状，比较粘稠。首先用纱布初滤一次，再用真空泵抽滤。 4.4 钙析：将滤液用盐酸调节至pH6~7,加入10%CaCI2溶液进行钙析。将钙析后的产品过滤后，再往里加入200ml 15%的NaCI溶液脱钙。往离子交换后的溶液中加入2倍量的95%乙醇，析出了白色海藻酸钠絮状沉淀，继而以85%和95%的乙醇依次洗涤脱水，最后30℃ 5．实验结果与分析 海藻酸钠提取率的计算： NaAlg(%)=(W1 NaAlg(%)=(W1/W2)×100% NaAlg表示海藻酸钠的提取率；W1表示海藻酸钠产品的质量；W2表示海带的质量(干重)。 6．思考题： 海藻酸钠提取的原理是什么？ 参考文献：周家华 崔英德 杨辉 等 食品添加剂 北京 化学工业出版社 2001， 250~254 实验二、海藻酸钠旋转粘度的测定 1．实验目的： 学习用旋转式粘度计测定海藻酸钠粘度的原理和方法 2．实验原理： NDJ-1旋转式粘度计工作原理：旋转粘度计上的同步电机l以一定的速度带动刻度圆盘2旋转，又通过游丝3和转轴带动转子4旋转。如果转子未受到液体的阻力,则游丝、指针与刻度盘同速旋转,指针在刻度盘上指出的读数为”0”。反之,如果转子受到液体的粘滞阻力,则游丝产生扭矩,与粘滞阻力抗衡最后达到平衡,这时与游丝连接的指针5在刻度盘上指示一定的读数(即游丝的扭转角)。将读数乘上特定的系数即得到液体的粘度。 本仪器转速由齿轮系统及离合器通过调速旋钮进行变速, 附有1-4号四种转子,可根据被测液体的高低随同转速配合选用;其装有指针固定控制机构,为精确读数用,当转速较快时(30转/分、60转/分)无法在旋转时进行读数,这时可轻轻按下指针控制杆,使指针固定下来,便于读数;还配有固定支架及升降机构,一般在实验室中进行小量和定温测定时应固定.把仪器固定于支架上以保证测量精确度;斜齿轮及阻尼升降机构,确保仪器升降平稳;引伸索便于在被测液体之容器较大而液面又较低时,及被测液体温度过高情况下使用. 3．实验材料： 1)材料 海藻酸钠 2)仪器 烧杯 旋转粘度计 恒温水浴 4．实验方法与步骤