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体外实验也证实多种因素(H2O2、UV-B、晶 状体蛋白的自身抗体)诱发的白内障模型中晶状体 上皮的损伤是晶状体混浊的主要环节[6-8]。因此， 从晶状体上皮细胞的变化入手探讨白内障的成因， 有可能抓住揭示白内障发病机理的主要环节。而晶 状体上皮细胞变化的基因调控机制是问题的关键所 在，也是有待我们深入研究的问题。 国内外现状分析（综述） 白内障的形成与晶状体的老化密不可分，是晶状体老化的极端表现。晶状体的老化是多种因素相互作用的结果，包括基因的和非基因的随机变化的不断积累，也有程序性的、非随机性的组织特异性多种基因表达的改变。目前，国内外对白内障相关基因的研究主要以下三方面： 国内外现状分析（综述） 一是对体外培养的晶状体白内障模型及上皮细胞的研究。UV-B辐射作用诱导的白内障中晶状体上皮细胞是主要的靶细胞，其Na-K-ATP酶的活性增加，蛋白质的合成和分泌增加；上皮细胞的凋亡增加，其中有c-fos基因的表达增加；还有组蛋白H4、H3 的低表达`和蛋白酶C、β-肌动蛋白、γ-肌动蛋白基因的高表达[9-12]。Carper等[13]利用RT-PCR-DD(reverse transcription-polymerase chain reaction differential display)技术研究H2O2诱导的晶体上皮细胞的基因差异性表达结果显示NADH脱氢酶4亚基、细胞色素b、谷氨酰胺转移酶基因表达减少以及细胞因子的核蛋白、替代拼接因子2 （alternative splicing factor）、β-三羟基异丁酰辅酶A水解酶基因表达的增加。 国内外现状分析（综述） 二是利用转基因动物的研究。波形纤维蛋白基因（vimentin）、杂交的Ⅲ型中间纤维蛋白基因的转基因小鼠表现出白内障，而且有随小鼠年龄增加白内障加重的趋势。晶状体改变的共同特点是晶状体纤维细胞分化受抑制[14,15]。Gong等[16]报告晶状体的细胞膜蛋白连接蛋白α3（α3 Connexin）基因敲除小鼠（knockout mouse）在晶状体形成的早期及纤维细胞分化早期不受影响，其后出现与晶状体蛋白溶解有关的核性白内障。虽然体外实验和白内障转基因小鼠都提示我们一些基因的变化与白内障有关，但是，这些变化的基因是否与老年性白内障形成有关，目前尚缺乏进一步的报告。 国内外现状分析（综述） 三是对人老年性白内障晶体上皮的研究。Lee[17]利用RT-PCR技术研究显示前极性白内障与核性白内障上皮细胞中纤维连接蛋白、I型胶原纤维、α-平滑肌蛋白、TGF-β1、TGF-β2、TGF-βⅡ型受体、结缔组织生长因子的基因表达有差异。Kantorow等[18]利用RT-PCR-DD研究老年性白内障与正常晶状体上皮的基因差异性表达的初步结果是老年性白内障有三个高表达基因和12个低表达的基因。但就DD-PCR技术来讲，在实验中难以解决假阴性、假阳性以及克隆全长cDNA的问题。 国内外现状分析（综述） 上述三方面的研究均取得了不同程度的研究结果，但由于当时技术条件的限制都未能全面阐明与白内障相关的基因及其功能。 寻找白内障时晶状体上皮细胞与正常晶状体上皮细胞间差异表达的基因有可能揭示白内障的发病机理。 国内外现状分析（综述） 寻找差异表达基因的经典方法是消减杂交技术（subtractive hybridization, SH），它是……，但是实验操作复杂。 经过改进后的抑制性消减杂交（suppression subtractive hybridization ,SSH是Diatchenko等1996年建立的方法）……简化了实验操作，但仍然问题很多。 我校生化教研室建立了改良消减杂交技术[19，20]，其特点是：简便易行，能够获得目的细胞特异表达的全长基因，对低丰度基因也能有效分离。 国内外现状分析（综述） 该方法的建立者已利用这一技术从脂多糖刺激前后的人牙髓细胞的差异表达的基因中克隆到脂多糖刺激后特异表达的基因，其中5个为新基因。同理，利用此方法也能快速、有效地获得白内障晶状体上皮细胞与正常晶状体上皮细胞间差异表达的基因，并克隆到全长cDNA，为进一步的结构和功能研究打下基础。 国内外现状分析（综述） 基因芯片技术的出现，使检测差异表达基因和未知DNA分子变得更快捷、准确、高效。基因芯片是在1996年被提出并开始研制的，该技术是将成千上万的DNA探针集中到1厘米见方的基片上，利用碱基互补原理，DNA探针中的已知碱基序列与被测定的未知DNA分子杂交后由标记分子标记杂交体，经自动阅读设备分析杂交结果，从而对检测基因进行定性、定量和结构分析，确定未知DNA分子。 国内外现状分析（综述）