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《医学形态学实验》 课程教学大纲 山东大学医学院 《医学形态学实验》课程教学大纲 课 程 名 称： 医学形态学实验 英 文 名 称： Medical morphological Experiment 课 程 编 号： 实 验 课 性 质：融合创新性实验 课 程 负 责 人： 开放实验项目数：8 大 纲 主 撰 人： 武玉玲、张庆慧、郝晶等人 大 纲 审 核 人： 一、学时、学分 课程总学时： 32 实验学时： 32 课程总学分： 实验学分： 二、适用专业及年级 供基础、临床医学、预防、口腔医学、护理学5、6、7年制专业用 三、实验教学目的与基本要求 通过医学形态学融合性实验教学，将人体解剖学、组织胚胎学和病理解剖学三个相关学科的交叉内容进行有机整合，形成系统化的知识。通过创新实验的学习，使学生学会使用医学形态学实验常用的仪器，熟悉科研常用的技术方法，培养学生动手能力、提高学生利用所学知识解决实际问题的能力，启迪学生的科研思维和创新精神，以适应研究型大学培养人才的要求。 四、主要仪器设备 1．动物： Wistar大鼠，昆明小鼠 2．仪器设备：显微图像观察系统、恒温培养箱，手术器械、微量注射器、常用染料。 五、实验课程内容和学时分配 序 号 实验项目 名 称 实 验 内 容 学时分配 实验要求 指 导 教 师 已开/未开 1 淋巴系统的组成 1．第1、2趾蹼间隙皮下注射0.2ml Patent blue，10分钟后在腘窝及腹股沟处切开皮肤，寻找蓝染的淋巴管及淋巴结（可追踪至腹膜后隙）。观察淋巴管及淋巴结的形态和分布。 2．将一段小肠系膜平铺于透明的载物台上，用显微图像观察系统观察小肠系膜内淋巴管的运动。注意寻找淋巴管的瓣膜。 3．小肠浆膜下注射适量Patent blue。观察淋巴管的吸收功能及引流。 4．追踪腹膜后隙染色的淋巴结。 5．在腹股沟处结扎、切断腹股沟淋巴结和淋巴管，造成淋巴引流障碍，观察淋巴淤滞和淋巴水肿的形成。 6．观察淋巴引流注射标本，淋巴结和淋巴管组织切片。总结淋巴系统的组成和功能。 4 分小组进行 丁兆习 未开 2 脊髓半切损伤的手术试验观察 将Wista大鼠麻醉固定于手术台。 切开背部皮肤，暴露脊柱，打开椎管，剪断一半脊髓。 缝合背部肌及皮肤。 待大鼠清醒后，观察大鼠损伤后的临床表现。 讨论并写出试验报告 4 分小组进行 邢子英 未开 3 肥大细胞的制作与观察 肥大细胞的制作与观察： 取健康大鼠一只，脱臼处死。随后剪取皮下组织，平铺置于载玻片上。用95％乙醇溶液固定、甲苯胺蓝染色，最后树胶封片。镜下观察肥大细胞形态、颗粒染色特点及肥大细胞走形分布特点。 大鼠Ⅰ型超敏反应动物模型的建立 取马血清用生理盐水按一定的比例稀释，然后给大鼠腹腔注射进行被动致敏。致敏后14 日再用马血清进行腹腔注射进行大鼠致敏实验。随后剪取皮下组织，观察肥大细胞脱颗粒情况。 4 分小组进行 张艳敏 未开 4 小鼠活精子标本的制作与精子低渗肿胀试验 1．活精子标本的制备与观察 取育龄期雄鼠附睾，将其剪成小块，制作小鼠活精子悬液。将悬液滴于载玻片上，低倍镜观察精子的活动情况。另取精子悬液涂片，用0.3％甲苯胺蓝液染色，光镜观察精子的形态结构。 2．体外抑精子实验 实验分组：（1）实验组：在37℃恒温条件下，取50μl精子悬液与等量一定浓度的抑精子药液充分混合，分别于混合后30 sec、5 min、10 min和30 min 时，取一滴混合液滴于载玻片上，显微镜下计数10个视野，记录活动精子百分率（或用伊红染料染色，计算精子存活率）。（2） 对照组：取50μl精子悬液与等量生理盐水混合，其余操作方法同上。比较在处理后不同时间内两组活动精子的百分率。 同时，分别取处理10 min分钟后的实验组及对照组的精子悬液，以1000～1500r/min 离心 5min，弃上清液，取沉淀于管底的精子涂片，用0.3％甲苯胺蓝液染色，光镜观察两组精子形态结构的不同。。 3．精子低渗肿胀试验 （1）将 735 mg 柠檬酸钠·2H2O 和1351 mg 果糖 溶于100 ml 蒸馏水中，配制成150 mol的低渗溶液（可考虑用蒸馏水代替低渗液）。（2）取0.1ml 处理后的精子混悬液 与 1ml 低渗液混合，于37℃ 下培养 30 min，然后在