胰岛素与肾上腺素对血糖浓度的影响.pptVIP

胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 实验目的 1、掌握胰岛素和肾上腺素对血糖水平的调节作用 2、熟悉分光光度计的使用。 二、实验原理 人和动物体内，血糖浓度受各种激素调节而维持恒定。胰岛素能降低血糖；其他很多激素则具有升高血糖的作用，其中以肾上腺素作用较为迅速而明显。胰岛素促进肝和肌将葡萄糖合成糖原，又加强糖的氧化利用，故可降低血糖；肾上腺素促进糖原分解而增高血糖。 人和动物体内，血糖浓度受各种激素调节而维持恒定。胰岛素能降低血糖；其他很多激素则具有升高血糖的作用，其中以肾上腺素作用较为迅速而明显。胰岛索促进肝和肌将葡萄糖合成糖原，又加强糖的氧化利用，故可降低血糖；肾上腺素促进糖原分解而增高血糖。 三、实验材料 1、 家兔。 2、722N型分光光度计。 3、试剂。 （1）草酸钠。 （2）葡萄糖。 （3）肾上腺素l mg/ml。 （4）胰岛素。 四、实验方法 1．动物准备：取正常家兔一只，实验前预先饥饿16 h，称体重(一般为2～3 kg)。 2．取血：心脏采血，放入含抗凝剂的试管中，约需5ml，混匀。（抗凝血1） 3．注射激素后取血：取饿兔血后，其中一组在兔皮下注射胰岛素，剂量按1 U/kg体重计算，并记录注射时间。30分钟后再取血。 另一组在兔皮下注射肾上腺素，剂量按0.4 mg/kg体重计算。并记录注射时间。15分钟后再取血。（抗凝血2) 制备无蛋白血滤液 3.5ml蒸馏水+ 0.5ml抗凝血 +0.5ml1/3mol/L硫酸+ 0.5ml 10%钨酸钠 混匀后离心五分钟，三档（1500转/分），将上清液用胶头滴管转移至干燥的试管中。即为无蛋白血滤液 比色测定 将各管颠倒混匀后，用空白管调零，在620nm处测定吸光值。 操作注意 1、等水沸腾后，才能放入血糖管。加热要准确8分钟。 2、冷却时切不可摇动血糖管，以免还原的氧化亚铜被空气中的氧再氧化，降低实际结果。 3、加入磷钼酸后迅速比色。 4、分光光度计的使用。 结果计算 * * 混匀后放置2min，临比色前加水至25ml 2ml 2ml 2ml 2ml 磷钼酸试剂 混匀，置沸水浴中煮8min。取出用自来水冷却（切勿摇动） 2ml 2ml 2ml 2ml 碱性铜试剂 1ml 1ml 1ml 2ml 蒸馏水 一 一 1ml 一 标准葡萄糖应用液 1ml 1ml 一 一 无蛋白血滤液 测定管2 测定管1 标准管 空白管 血糖管 试剂ml 分光光度计的使用 1、接通电源，打开比色皿盖，预热20-30分钟后，调节波长至所需波长。 2、将盛有空白溶液的比色皿放在比色架的第一格，其余放测定溶液。将比色皿盖盖上，此时空白溶液在光路上。将光点调到“T”，调节 T为100%。 3、将光点调到“A”，轻轻拉动比色架固定拉杆，使第二个比色皿溶液处在光路中，此时读数即为该溶液的吸收度。 4、依次拉出第三、第四个比色皿，分别读取吸收度。 5、测定完毕，先打开比色皿盖，再断电源。 测定管吸收度 标准管吸收度 0.1 × 0.5551 / = 1L血液中的血糖mmol数