中国药品检检验标准操作规范高效液相色谱法.docVIP

高效液相色谱法 高效液相色谱法（《屮国药典》2010年版二部附录V D）系采用高压输液泵将规定的流动相 泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。注入的供试品，由流动相带入 柱内，各组分在柱A被分离，并依次进入检测器，巾积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信 号。 1对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪，由输液泵、进样器、色谱柱、检测器和色谱数据处理系统 组成，仪器应按现行国家技术监督局“液相色谱仪检定规程”定期检定并符合有关规定。 1.1色谱柱最常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性填充剂，以 I ?八烷基硅烷键合硅胶最为常用，辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶（如氰基键合 硅烷和氨基键合硅烷等）也有使用。止相色谱系统使用极性填充剂，常用的填充剂有硅胶等。 离子交换色谱系统使用离子交换填充剂；分子排阻色谱系统使用凝胶或高分子多孔微球等填充 剂；对映异构体的分离通常使用手性填充剂。 填充剂的性能（如载体的形状、粒径、孔径、表面积、键合基W1的表面覆盖度、含碳暈和 键合类型等）以及色谱柱的填充，直接影响供试品的保留行为和分离效果。孔径在 15nm（lnm — 10A）以下的填料适于分析分子量小于2000的化合物，分子量大于2000的化合物则 应选择孔径在30nm以上的填料。 除另有规定外，分析柱的填充剂粒径一般在3?10pn之问。粒径更小（