酶工程课程试验教学大纲试验课程基本情况课程代码.DOC

《酶工程》课程实验教学大纲 一、实验课程基本情况 课程代码课程类别 专业任选课 课程性质 任选课 课程学时数 54 实验学时数 12 课程学分数 3 承担单位 生物与制药工程学院 承担实验室 生物工程实验室 先修课程 生物化学 适用对象 制药工程（生物药剂工程）专业。 实验教材和主要参考资料 万东石，《酶工程实验指导》，兰州大学出版社，2011年1月 参考资料： 姜伟 曹云鹤，《发酵工程实验教程》，科学出版社，2014年6月 禹邦超 周念波，《酶工程》，华中师范大学出版社，2014年1月 实验课程简介 《酶工程》是制药工程的主要内容之一，是现代酶学和生物工程学相互结合而发展起来的一门新的技术学科。它将酶学、微生物学的基本原理与化工、发酵等工程技术有机结合起来，并随着酶学研究的迅速发展，特别是酶的广泛应用而在国民生产生活中日益发挥着越来越重要的作用。酶工程实验课是制药工程等本科实验教学的一个重要组成部分，通过实验教学可以加强学生对酶工程基本知识和基本理论的理解，掌握现代酶学与相关技术的有关的基本的实验原理与技能。在实验过程中要求学生自己动手，分析思考并完成实验报告。酶工程实验性质有基础性、综合性、设计（创新）性三层次。。 实验教学目的和基本要求 本实验课程主要根据酶工程的三大块内容即酶的生产、酶的改性与酶的应用来设计安排实验，通过这些实验内容，使学生深入理解酶工程课程的基本知识；巩固和加深所学的基本理论；掌握酶工程中基本的操作技能。同时，通过实验培养学生独立观察、思考和分析问题、解决问题和提出问题的能力，养成实事求是、严肃认真的科学态度，以及敢于创新的开拓精神；并在实验中进一步提高学生的科学素养。 实验内容与学时分配 项目 序号 实验项目名称 实验类别 计划学时 实验类型 实验要求 1 淀粉酶动力学分析 专业任选课 4 验证 必修 2 淀粉酶的离子交换层析 专业任选课 2 验证 必修 3 大蒜细胞SOD的提取和分离? 专业任选课 2 验证 必修 4 尼龙固定化木瓜蛋白酶 专业任选课 2 验证 必修 5 果胶酶在果汁生产中的作用 专业任选课 2 验证 必修 五、实验方式及具体要求 　　课堂教学与实验教学结合。课堂教学合班上课，实验课分小班进行，每4人一组。实验设计尽量从实际生产中提出问题，增加学生对实际动手操作的兴趣，安排每个人动手。通过实际操作巩固掌握教材相关理论知识。 六、考核方法 实验成绩占课程总成绩的20%。主要考察学生每次实验的表现：动手操作能力，观察能力，解决问题的能力等。其次检查实验报告的书写情况是否认真准确。 七、实验内容安排 【实验一】淀粉酶动力学分析（4学时） 一、实验目的： 了解并掌握米氏常数的意义和测定方法。 二、实验要求： 掌握米氏常数的意义和测定方法，掌握酶反应的动力学分析方法。 三、实验步骤： 1、酶反应：取13支干燥的18×180 mm试管，按下表编号，实验组做两份平行实验，加入pH5.0的淀粉溶液和α-淀粉酶溶液，50℃反应10分钟 2、酶反应速度测定：酶反应液稀释一定倍数（约5倍，取1 mL反应液，加4 mL蒸馏水，混匀），取1 mL稀释液加DNS试剂，于沸水浴中加热2 min进行显色，取出后在盛有冷水的500 mL烧杯中冷却（注意换冷水），各加入蒸馏水9.0 mL，摇匀，以空白管为调零点，在540 nm波长测定吸光度值，从标准曲线查出葡萄糖的含量，算出酶反应速度（mol/（L·min））。 3、酶反应动力学分析：分析酶反应动力学。 【实验二】淀粉酶的离子交换层析（2学时） 一、实验目的： 通过实验，掌握离子交换柱层析法的基本操作技术。 二、实验要求： 掌握离子交换柱层析法的基本操作技术。 三、实验步骤： 1、装柱：取直径1cm，长度20cm的层析柱。将柱垂直安装于铁架上。自顶 部注入处理好的树脂悬浮液，树脂沉降时，多余的液体从出口流出，不断缓慢添树脂悬浮液，至树脂沉降至15cm左右的高度即可。 2、平衡并调整流速：在层析柱中充满平衡缓冲液，将上端柱头旋紧，用大 约20ml平衡缓冲液平衡树脂，同时将流速调整为2.0ml/min。 3、上样：打开柱子上端柱头，让柱内缓冲液流出，液面与树脂面相切，关 闭出口；由柱上端仔细加入蛋白样品0.5ml，打开出口，让样品进入树脂，同时开始收集流出液；当柱内液面与树脂面相切时关闭出口；加入0.5ml平衡缓冲液，打开出口，待缓冲液面与树脂面相切时关闭出口，再加入0.5ml缓冲液，重复此步骤。缓慢添加平衡缓冲液直至顶端，旋好柱头。 4、洗脱：采用不断提高离子浓度的方法阶段洗脱蛋白。以2.0ml/min流速， 用体积为50ml平衡缓冲液、50ml洗脱缓冲