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非发酵革兰阴性杆菌包括假单胞菌属、产碱杆菌属、无色杆菌属、不动杆菌属、莫拉菌属、金氏杆菌属、艾肯菌属、土壤杆菌属、丛毛单胞菌属、黄杆菌属、黄单胞菌属等。 非发酵菌特点 氧化酶试验:绝多大数为+; 葡萄糖氧化/发酵试验(O/F):大多数为氧化型,产生弱酸; 动力:悬滴法或鞭毛染色,以鉴别某些有动力的非发酵菌。 麦康凯(MAC)生长情况:绝大多数长出微小菌落,少数不生长。 假单胞菌属 假单胞菌属为需氧、有鞭毛、运动活泼,不形成芽胞有荚膜的革兰阴性杆菌,氧化酶试验阳性,包括200多个种。多数为腐生菌,少数为植物和动物寄生菌;大多为条件致病菌。代表菌铜绿假单胞菌。 假单胞菌属分布广泛,土壤、水和空气中均有存在,人类非发酵菌感染中,假单胞菌占70%~80%,主要为铜绿假单胞菌,其他较为常见的菌种有嗜麦芽窄食单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌、产碱假单胞菌等。这些菌种也是医院感染的主要病原菌。 微生物特性 形态染色 G-直或微弯、较细长、散在排列、无芽胞有荚膜、有端鞭毛或丛鞭毛。 铜绿假单胞菌电镜图 铜绿假单胞菌菌落特征(普通琼脂平板) 铜绿假单胞菌菌落特征(血琼脂平板) 铜绿假单胞菌菌落特征(MAC) 生化反应 铜绿假单胞菌能够分解葡萄糖、木糖,产酸不产气,但不分解甘露醇、麦芽糖、蔗糖和乳糖。液化明胶。分解尿素,氧化酶阳性,还原硝酸盐产生氮气,吲哚阴性,利用枸橼酸盐,精氨酸双水解酶阳性。 氧化酶试验(+) O/F试验(氧化型) 硝酸盐还原试验(+) 抗原性 有两种抗原:O抗原 和H抗原,O抗原包括: 内毒素脂多糖:是保护性抗原 原内毒素脂多糖(OEP):是一种高分子抗原、具有强免疫性,其抗体不仅对同一血清型细菌有特殊性保护作用,且对不同血清型的细菌也有共同保护作用。 OEP广泛存在于一些革兰阴性菌中,包括其它类的单胞菌、大肠埃希菌、肺炎克氏菌和霍乱弧菌等,是一种极有意义的类属抗原。 抵抗力 较其它革兰阴性菌强,耐许多化学消毒剂与抗生素;560C 1h可杀死细菌。 致病物质 侵袭力: 粘附素、荚膜多糖 外毒素: 外毒素A 、溶血素、肠毒素、 杀白细胞素 内毒素 绿脓素 侵袭性酶类: 弹性蛋白酶、胞外酶S、 磷脂酶C 铜绿假单胞菌检验程序 检验结果分析与报告 结合临床感染症状,患者血、尿液及无菌体液中分离到铜绿假单胞菌,特别是反复检出即可确定是感染病原菌。如无感染的临床表现,应作为正常菌群。 防治原则 铜绿假单胞菌可由各种途径传播,但主要是通过污染医疗器械、用具及带菌医护人员引起医源性感染。 不动杆菌 为一群不发酵糖类、氧化酶阴性、不能运动的G-杆菌、常分离到的菌种有醋酸钙不动杆菌、洛菲不动杆菌、溶血不动杆菌等,DNA G+C mol%为38~46.5。 存在于正常人体的皮肤、呼吸道和泌尿道,是引起医院感染的常见病原菌,为条件致病菌,常从感染患者的血、尿、脓液及呼吸道分泌物、脑脊液等标本分离。 生物学性状 革兰阴性杆菌,多为球杆状,常见成对排列,可单个存在,有时呈丝状或链状。 无芽孢,无鞭毛,粘液性菌株有荚膜。 为专性需氧菌,对营养要求一般,最适生长温度为35℃ 鲍曼不动杆菌革兰染色 溶血不动杆菌菌落特征(血琼脂平板) 鲍曼不动杆菌菌落特征(MAC) 临床意义 条件致病菌,医院感染的常见病原菌。 所致疾病包括肺炎、尿路感染、皮肤和伤口感染、心内膜炎、脑膜炎和腹膜炎等。 不动杆菌属检验程序 产碱杆菌属 与临床有关的有粪产碱杆菌及亚型、皮乔特产碱杆菌、木糖氧化产碱杆菌及亚种,DNA G+C mol%为56~70,典型菌种为粪产碱杆菌。 人体的正常菌群,是医院感染的病原菌,可引起抵抗力低下患者发生败血症,并可从患者呼吸道、尿液、血液及脑脊液中分离出来。 为G-杆菌,呈链状、周鞭毛、有动力,无荚膜。 在普通培养基上18~24h形成无色透明菌落 。氧化酶及触酶均阳性,不分解任何糖类,O-F试验碱性,脲酶阴性,不液化明胶。 粪产碱杆菌 革兰阴性短杆菌,常成双、链排列; 专性需氧,营养要求不高,MAC、SS上成无色透明菌落;液体培养基中均匀混浊、菌膜,管底形成粘性沉淀,在蛋白胨肉汤中产氨,使pH升至8.6,为鉴别特征。 氧化酶+,触酶+,柠檬酸盐+; 致病:引起创伤和泌尿道感染。 粪产碱杆菌菌落特征(MAC) 黄杆菌属 为一群无动力和芽胞、氧化酶阳性的G-杆菌。与临床相关菌种有短黄杆菌、脑膜炎败血性黄杆菌、芳香黄杆菌、水田黄杆菌、嗜糖黄杆菌、嗜醇黄杆菌、嗜温黄杆菌。模式菌种为水田黄杆菌。 本菌
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