第三章样品制备精选文档.pptVIP

本节首页 退出本章 5、制备衍生物的反应罐瓶 五 、生物大分子的细胞破碎与蛋白质的去除 本节首页 退出本章 （一）、生物样品 植物：营养成分、农药残留等 动物：体内的药物及代谢产物、 糖类、维生素、氨基酸等 微生物： 待测物的位置 本节首页 退出本章 体液或细胞外：采用萃取方法。也可将干扰组分（如蛋白质、DNA、多糖等等）沉淀除去。 生物细胞内：首先将细胞破碎，再采用萃取或沉淀等方法。 * 第三章 样品制备 学习指南 观察思考 课外阅读 复习自测 退出本章 演示文稿 本章目录 辽农职院 工程系 质检中心 目的要求 样品前处理在色谱分析过程中是一个既耗时又极易引进误差的步骤，样品处理的好坏直接影响色谱分析的最终结果，因此，为了提高分析测定效率，改善和优化色谱分析样品制备方法和技术是一个重要问题。 通过本章的学习，目的是使学生掌握溶剂萃取、固相萃取、超临界流体萃取、微波萃取以及衍生化技术等色谱分析用样品的前处理方法，了解有关样品前处理仪器的一些相关知识。 学习要点　溶剂萃取技术；蒸馏及精馏技术；固相萃取技术；气体萃取技术；超临界流体萃取技术； 微波萃取技术；衍生化技术 　 技能要点　溶剂萃取技术；蒸馏及精馏技术；固相萃取技术；超临界流体萃取技术；波萃取技术 学习目标 本节首页 退出本章 第五节 超临界萃取技术等 一、超临界萃取技术 二、微波萃取技术 三、超声波辅助萃取 本节首页 退出本章 四、衍生化技术 五 、生物大分子的细胞破碎与蛋白质的去除 一 、超临界萃取技术 本节首页 退出本章 临界温度：32℃ 一 、超临界萃取技术 本节首页 退出本章 1、三相点和临界点 本节首页 退出本章 临界点：液、气两相呈平衡状态的点。 临界温度：在临界点时的温度。 临界压力：在临界点时的压力。 2 、超临界流体 本节首页 退出本章 物体处于其临界温度和临界压力以上时的状态。 气体：粘稠度、表面张力低，溶解能力强，萃取功能高。压力↑，溶解能力↑。 液体：体积小。 流体名称 分子式 临界压力 (bar) 临界温度 (℃) 临界密度 (g/cm3) 二氧化碳 CO2 72.9 31.2 0.433 水 H2O 217.6 374.2 0.332 氨 NH3 112.5 132.4 0.235 乙烷 C2H6 48.1 32.2 0.203 氧化二氮 N2O 71.7 36.5 0.450 3 、超临界流体的性质 4 、特 点 本节首页 退出本章 ⑴ 在35～40℃下提取 ⑵ 干净的提取方法 ⑶ CO2是一种不活泼的气体。 ⑷ 循环使用，降低成本。 ⑸ 参数可以调节 流动相 二 、微波萃取 本节首页 退出本章 微 波 金属 水分 二 、微波萃取 本节首页 退出本章 二 、微波萃取 本节首页 退出本章 1、微 波 本节首页 退出本章 频率：300—300 000MHz的电磁波。 穿透：玻璃、塑料、陶瓷等绝缘体。 当微波作用于水和酸性物质时，将被极性分子所吸收，因而物质很快被加热。 2 、工作原理 本节首页 退出本章 吸收微波→细胞内部温度↑，→细胞内部压力超过细胞壁膨胀承受能力→细胞破裂→有效成分自由流出。 本节首页 退出本章 3、影响因素 ㈠ 萃取温度的影响 ㈡ 萃取溶剂的影响 ㈢ 样品杯：聚四氟乙烯 本节首页 退出本章 三、超声波辅助萃取 能量→外部向内部→传递。 超声波使溶液形成气泡（空化效应）→爆裂→温度和压力↑，→增强化学反应能力。 本节首页 退出本章 三、超声波辅助萃取 优点：价廉快速，简便安全，批量处理样品。 四 、衍生化技术 本节首页 退出本章 化学反应→定量生成→适于分析。 1 、衍生化的目的 本节首页 退出本章 ① 灵敏度与选择性 ② 改善色谱分离： 挥发性、降低与色谱材料的相互作用 ③ 理化稳定性 2 、分 类 本节首页 退出本章 柱前衍生化：为了分离 柱后衍生化：为了检测 3、气相色谱的衍生化 本节首页 退出本章 （1）硅烷化衍生化方法 （2）酯化衍生化方法 （3）卤化衍生化方法 （4）酚化衍生化方法 方法 （1）、硅烷化衍生化方法 本节首页 退出本章 利用醇，酚，酸，胺等与硅烷化试剂反应，形成挥发性的硅烷衍生物 R3Si—X + H—R` R3Si—R` + H—X （2）酯化衍生化方法 本节首页 退出本章 大多数有机酸挥发性、热稳定性差。在GC分析之前衍生为相应的酯。 ① 甲醇法 ② 重氮甲烷法 ③ 三氟乙酸配法 ① 甲醇法 本节首页 退出本章 甲醇法 有机酸与甲醇在催化剂的存在下加热，可以发生酯化反应，生成有机酸的甲酯 RCOOH + CH3OH 催化剂 RCOO CH3 + H2 O △ ② 重氮甲烷法 本节首页 退出本章 与有机酸反应，