第一节 吸光光法的基本原理第二节 光吸收的基本定律第三.pptVIP

第十三章 吸光光度法 第一节 吸光光度法的基本原理 一、光的基本性质 一、光的基本性质 光是一种电磁波，如果按波长或频率排列，有如下所示的电磁波谱。 二、溶液对光的选择性吸收 人的眼睛能感觉到的光称为可见光，其波长大约在 400 ~ 760 nm范围内。通常将具有同一波长的光称为单色光，由不同波长的单色光组合得到的光称为复合光。 溶液之所以呈现不同的颜色，是由于溶液对不同波长的单色光选择吸收而产生的。当一束白光通过一有色溶液时，某种波长的单色光被溶液吸收，而其他波长的单色光透过溶液。因此，溶液呈现的颜色取决于透过光的颜色。 三、吸收曲线 如果将不同波长的光通过一定浓度的某一溶液，分别测定溶液对各种波长的光的吸光度。以入射光的波长 λ 为横坐标，相应的吸光度 A 为纵坐标作图，可得到一条吸光度随波长变化的曲线，称为吸收曲线或吸收光谱。 第二节 光吸收的基本定律 一、Lambert-Beer 定律 二、偏离 Lambert-Beer 定律的原因 一、Lambert-Beer 定律 吸光度和透光率的定义分别为： 例13-1 用邻菲罗啉法测定铁，已知 Fe2+ 的质量 浓度为 1.0 10-3 g·L-1。用2cm吸收池，在波长508 nm 处测得吸光度A 为0.38，计算铁 邻菲罗啉 配离子的摩尔吸收系数。 解：Fe3+浓度为： 二、偏离 Lambert-Beer 定律的原因 根据 Lambert-Beer 定律，以 A 为纵坐标，以 cB或ρB 为横坐标作图，应得到一条通过原 点的直线。 但在实际测定中，常会出现标准曲线偏离 直线的现象，曲线向上或向下发生弯曲，这种 现象称为偏离 Lambert-Beer 定律。 对波长为 的单色光： 对波长为 的单色光： 即总吸光度 A总与浓度 cB仍服从 Lambert- Beer 定 律。此结论可能对应以下两种不同的情况： （1） 很小，可近似认为 ， 入射光近似为单色光，故 A 与 cB仍成正比。 （2）尽管 较大，但在所选择的入射光波长 范围附近吸收曲线较平坦，因此κ变化较小，故 A 与 cB仍保持较好的线性关系。 若 较大时， 不等于 ，则 A 与 cB 不 成正比而偏离 Lambert-Beer 定律， 与 相差 越大，偏离就越显著。 3. 介质不均匀引起的偏离 若溶液中生成溶胶或发生浑浊，当入射光通过该溶液时，除一部分被吸光物质吸收外，还有一部分被溶胶粒子和粗分散粒子散射而损失，使透光率减小，实测的吸光度偏高，从而对 Lambert-Beer 定律产生正偏离。 第三节 吸光光度法分析条件的选择 一、显色反应及其条件 二、测定波长的选择 三、吸光度范围的选择 四、参比溶液的选择 一、显色反应及其条件 可见光区的吸光光度法只能用于测定有色 溶液。对无色溶液和颜色较浅的溶液进行测定时，必须加入一种能与被测组分反应生成颜色 较深的有色化合物的试剂，然后再进行测定。 将被测组分转变成有色化合物的化学反应称为 显色反应，能与被测组分反应使之生成有色化 合物的试剂称为显色剂。 显色剂必须满足下述条件： （1）灵敏度要高：可见吸光光度法一般用于微量组分的测定，因此要求选择的显色剂能与待测组分生成摩尔吸收系数较大的有色化合物。生成的有色化合物的摩尔吸收系数越大，对入射光的吸收程度越大，测定的灵敏度就越高。 （2）选择性要好：选用的显色剂最好只与待测组分发生显色反应，而与溶液中共存的其他干扰离子不显色，或者显色剂与被测组分所生成的有色化合物的颜色和显色剂与干扰离子所生成有色化合物的颜色有明显的不同。 （2）溶液的酸度对显色剂的平衡浓度和颜色的影响：大多数显色剂是有机弱酸或有机弱碱，当溶液的 pH 变化时，将影响显色剂的平衡浓度，并影响显色反应的完全程度。另外，有一些显色剂本身就是酸碱指示剂，它们在不同 pH 的溶液中具有不同的结构，而产生不同的颜色，所以对显色反