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人血红素氧合酶2HO-2酶联免疫分析ELISA试剂盒使用说明书
ELISA
人血红素氧合酶2 (HO-2)酶联免疫分析 ( )
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关
液体样本中血红素氧合酶2(HO-2)的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血红素氧合酶2 (HO-2)水平。用纯化的人
血红素氧合酶2 (HO-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血
红素氧合酶2 (HO-2),再与HRP 标记的血红素氧合酶2 (HO-2)抗体结合,形成抗体-抗
原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝
色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血红素氧合酶2 (HO-2)呈
正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人血红
素氧合酶2 (HO-2)浓度。
试剂盒组成:
试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存
说明书 1份 1 份
封板膜 2 片(48) 2 片(96)
密封袋 1个 1 个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品:900ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存
标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存
酶标试剂 3ml×1瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3ml×1瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存
显色剂A 液 3ml×1瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存
显色剂B 液 3ml×1瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存
20 倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 23ml×1 瓶 2-8℃保存
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20 分钟,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20 分钟后,离心
20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次
离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20 分钟左右(2000-3000 转/
分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS (PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞
1
浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分
钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀
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