海藻酸钠-氯化钡微囊化大鼠胰岛同种异体移植治疗糖尿病的实验观察及微囊免疫隔离机制的初步研究-内科学(内分泌)专业论文.docxVIP

南京医科大学硕士学位论文海藻II,l内一氯化钡截囊化失鼠胰岛同种异体移植治疗糖尿病的实 南京医科大学硕士学位论文 海藻II,l内一氯化钡截囊化失鼠胰岛同种异体移植治疗糖尿病的实 验现察及微囊免疫隔离机制的初步研究 摘要 目的建立一种实用可靠的大鼠胰岛和海藻酸钠．氯化钡微囊制 备方法，并观察微包囊的生物相容性，研究胰岛和微囊化胰岛的生物 学活性与差异。初步探讨海藻酸钠．氯化钡微包囊在同种异体胰岛移 植中的免疫隔离作用。 方法采用改良胶原酶消化法，分离纯化胰岛，进行形态及功能 鉴定后，用自制微囊成囊仪，一步法制备海藻酸钠．氯化钡微囊。移 植于链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾包膜下及腹腔内，术后 动态观察血糖。试验终点是血糖的控制、大鼠存活时间及体重的增加。 并同时以OG17试验检测微囊化胰岛功能，以胰岛淋巴细胞混合培养 检测淋巴细胞增殖能力，ELISA法检测培养上清中白介素．2(IL．2) 和、，．干扰素(IFN吖)含量。 ／鳍果(1)平均每个sD大鼠胰腺,-j-以获得(1024±156)个胰岛，纯 化后胰岛数为8674-104，活率≥95％。该法制备的胰岛形态结构完好， 体内外试验表明其功能良好。(2)体外培养，微裳化胰岛具有良好的 胰岛素分泌功能，与未微囊化胰岛功能无明显差异(Po．001)。微囊化 胰岛移植组糖尿病大鼠在移植后48～72h血糖均降至正常，完全缓解 率达100％。微囊化胰岛移植组胰岛有功能存活时N6W。(3)微囊 化胰岛移植组的刺激指数(sI)与正常组比较物无显著性差异(Po．05)， 便、可靠，胰岛的产量、纯度和活率高的优点，经体内外试验证明胰 南京医科大学硕士学位论文岛生物学功能良好。(2)纯化海藻酸钠-氯化钡微囊具有良好的组织相 南京医科大学硕士学位论文 岛生物学功能良好。(2)纯化海藻酸钠-氯化钡微囊具有良好的组织相 容性。(3)海藻酸钠-氯化钡微囊化胰岛可明显延长同种异体移植物的 存活时间，具有较好的免疫隔离作用。 关键词胰岛；分离；纯化；同种异体移植；大鼠；微包囊；细胞 因子；免疫隔离，撬尿语 本课题受江苏省医学重点学科项目基金青助． 南京医科大学硕士学位论文Study 南京医科大学硕士学位论文 Study 011 the immunoisolating effects of barium‘alginate microencapsulation Oil rat islets allografl survival Abstraet Objective To develop a reliable meth，od for isolating、purifying and encapsulating rat pancreatic islets，and observe the characteristics of the purified and microencapsulated islets in vitro and in vivo，and the immunoisolating effect of barium—alginate microencapsulation on islets allograft survival． Methods The Sprague Dawley rat pancreas was digested in situ by the injection of collagnase solution into the pancreatic duct and was purified by Ficoll一400 discontinuous density gradient or filtration through cell strainer．A simple droplet generator was used for encapsulation of the rat pancreatic islets with the purified alginate crosslinked with BaCl2．The naked islets and microencapsulated islets were transplanted under the kidney capsule or intraperitoneally into Wistar rats with STZ-induced diabetes．The blood glucose and insulin secretion of grafts were observed． The funtion of lymphocyte proliferation was measured by means of lymphocyt