《生物化学》教学：第十一章 RNA的生物合成（转录）.pptVIP

第 十 一 章; 本章内容;1、生物体以DNA为模板合成RNA的过程，称为转录(transcription) 。 DNA的遗传信息传递给RNA的过程。 ; 2、RNA指导的RNA合成(RNA-dependent RNA synthesis)，也叫RNA复制, 常见于病毒，是逆转录病毒以外的RNA病毒在宿主细胞以病毒的单链RNA为模板合成RNA的方式。 ;参与转录的物质;原核生物转录的模板和酶 Templates and Enzymes;一、转录模板;; 2. DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链，称为模板链(template strand)，也称作有意义链或Watson链。 相对的另一股单链是编码链（coding strand）,也称反义链或 Crick链。;二、RNA聚合酶;作用特点： 1、DNA为模板 2、不需引物，两游离NTP或一游离NTP与RNA链聚合. 3、3-OH与5-P聚合形成磷酸二酯键。 4、方向：5→3。;（一）RNA聚合酶由多个亚基组成;核心酶 (core enzyme);三、RNA聚合酶结合到DNA的 启动子上起动转录;开始转录;; RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 ;原核生物的转录过程 The Process of Transcription;转录起始需解决两个问题： RNA聚合酶必须准确地结合在转录模板的起始区域。 DNA双链解开，使其中的一条链作为转录的模板。;转录起始过程：;2. DNA双链局部解开，形成开放转录复合体(open transcription complex) ；;4.第一个磷酸二酯键生成后，σ亚基即从转录起始复合物上脱落，核心酶连同四磷酸二核苷酸，继续结合于DNA模板上，酶沿DNA链前移，进入延长阶段。 ;1. ?亚基脱落，RNA–pol核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移；;转录空泡(transcription bubble)：;;转录过程的电镜照片;依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止;1.依赖 Rho因子的转录终止;ρ因子的作用原理： ρ因子与RNA转录产物结合，结合后ρ因子和RNA聚合酶都可发生构象变化，从而使RNA聚合酶停顿，解螺旋酶的活性使DNA/RNA杂化双链拆离，利于产物从转录复合物中释放 。;2. 非依赖 Rho因子的转录终止;5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU... 3` ;茎环结构终止转录的机理;真核生物的转录过程 The Process of Transcription in Eukaryote;真核生物的转录过程比原核复杂。二者的转录起始过程有较大区别，转录终止也不相同。 ;一、 真核生物有三种DNA依赖性RNA聚合酶;真核生物的RNA聚合酶;二、转录起始;顺式作用元件包括启动子、启动子上游元件或promoter-proximal elements等近端调控元件和增强子(enhancer)等远隔序列。 起始点上游多数有共同的TATA序列，称为Hognest盒或TATA盒(TATA box)。通常认为这就是启动子的核心序列。 ; 启动子上游元件是位于TATA盒上游的DNA序列，多在转录起始点约-40～-100nt的位置，比较常见的是GC盒和CAAT盒。 增强子是能够结合特异基因调节蛋白， 促进邻近或远隔特定基因表达的DNA序列;;（二）转录因子(transcriptional factors, TF);Ⅱ型基因中的四类转录因子 ;（三） 转录起始前复合物;RNA聚合酶II与启动子的结合、启动转录需要多种蛋白质因子的协同作用。通常包括： （1）可诱导因子或上游因子与增强子或启动子上游元件的结合； （2）通用转录因子在启动子处的组装； （3）辅激活因子和/或中介子在通用转录因子/RNA聚合酶II复合物与可诱导因子、上游因子之间的辅助和中介作用。 因子和因子之间互相辨认、结合，以准确地控制基因是否转录、何时转录。;PIC的形成;三 、真核生物转录延长过程中没有转录与翻译同步的现象;四、真核生物的转录终止和加尾修饰 同时进行;真核生物的转录终止，是和转录后修饰密切相关的。 真核生物mRNA有聚腺苷酸(poly A)尾巴结构，是转录后才加进去的。 转录不是在poly A的位置上终止，而是超出数百个乃至上千个核苷酸后才停顿。;真核生物RNA的加工 Post-transcriptional Modification;真核生物转录生成的RNA分子是初级RNA转录物(primary RNA transcript)，几乎所有的