微生物标本采集标准操作规程鲁山人民医院院感办王玉新201402.PPTVIP

环境卫生学监测采样方法鲁山县人民医院院感办王玉新 2016.02 主要内容： 1、空气净化监测标本采集 2、物体表面监测标本采集 3、医务人员手卫生监测标本采集 4、使用中的消毒液监测标本采集 5、消毒物品监测标本采集 一、环境微生物学监测的采样规范 空气净化监测标本采集 沉降法： 1、采样时间 消毒处理后与进行医疗活动之前 2、采样高度 距地面垂直高度80--150cm 3、采样点的设置 非洁净房间：室内面积≤30m2，在对角线上设内、中、外三点。 里、外两点位置各距墙1m；室内面积30m2设东、西、 南、北、中5点。其中东、西、南、北四点均距墙1m， 9cm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送培养。 空气净化监测标本采集 非洁净房间结果判断： Ⅱ 类环境：包括普通手术室、产房、导管室、新生儿室（NICU）、血液病病区、、烧伤病房、重症监护病房。这类环境要求空气中的细菌总数≤４.0cfu/(15min·直径９cm平皿)； Ⅲ 类环境：包括儿科病房,母婴同室、CSSD检查包装灭菌区和无菌物品存放区、血液净化中心、各类普通病室和房间； IV类环境：普通门（急）诊及其检查、治疗室，、检验科、感染性疾病科门诊和病区； Ⅲ、IV类环境要求：空气中的细菌总数≤4cfu/(5min·直径9cm平皿)。 空气净化监测标本采集 洁净房间：房间在空态或静态条件下，根据房间的不同级别进行布点： 1、局部百级、周围千级：手术区布放5点（双对角布点），周边区布放8点（每边内2点），中间布点。如图： 空气净化监测标本采集 2、局部千级，周围万级：手术区布放3点（对角布点），周边区布放6点（长边内2点，短边内1点）结果判定： 手术区：0.75个/30min·90皿； 周边区：1.5个/30 min·9Ф皿； 表面最大染菌密度：5个/cm2 空气净化监测标本采集 3、局部万级、周围十万级：手术区布3点（对角布点），周围布四点（每边内1点）；结果判断： 手术区：2个/30min·90皿； 周边区：4个/30 min·9Ф皿； 表面最大染菌密度：5个/cm2 空气净化监测标本采集 4、十万级：布放5点（避开送风口正下方）；结果判断： 4个/30min·90皿； 表面最大染菌密度：5个/cm2 空气净化监测标本采集 5、三十万级：面积30m2布放4点，面积≤30m2布放2点（避开送风口正下方）；结果判断： 5个/30min·90皿； 表面最大染菌密度：5个/cm2 空气净化监测标本采集 采样注意事项： 1、采样者要做好手卫生，佩戴帽子口罩等个人装备，进入洁净房间取样必须穿洁净服； 2、皿盖打开顺序应先内后外；手臂及头不可越过培养皿上方；行走动作要轻，尽量减少对空气流动状态的影响；皿盖应扣放，以防污染； 3、采样结束后，由外向内合上皿盖； 4、采样完毕的培养皿应在6h内送培养 （二）物体表面监测采样 采样时间：消毒处理后4h内 采样方法： 被采样本面积100cm2取全部表面； 如采样面积≥100cm2，连续采4个位置（不可有重叠），每个位置采5cm×5cm的大小，用浸有无菌生理盐水的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml无菌生理盐水试管内。 不规则的物体表面，用棉拭子直接涂擦，采样面积≥30cm2 物体表面监测采样 采样注意事项： 1、取样后送检时间不得超过6h；若样品存于4℃，则不得超过24h； 2、消毒后采样一定要采用中和剂，不同消毒剂所用的中和剂不同； 结果判断： 1、洁净手术部、普通手术室、产房、导管室、NICU、ICU、烧伤病房、血液病病区，物体表面细菌菌落总数≤5cfu/㎝2； 2、儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、CSSD、血液净化中心、急诊科、检验科、各类普通病室、感染性疾病科门诊及其病房等，物体表面细菌菌落总数≤10cfu/㎝2 （三）手卫生监测标本采集方法 监测时机： 在接触患者前或进行诊疗活动前采样。 采集材料 1、无菌洗脱液A（吐温1g，蛋白胨10g，氯化钠8.5g，蒸馏水1000ml）：用于普通洗手、乙醇类速干消毒剂手消毒。 2、无菌洗脱液B（吐温1g，蛋白胨10g，氯化钠8.5g，亚硫酸钠2.0g，蒸馏水1000ml）：用于碘制剂的手消毒。 3、无菌洗脱液C（吐温1g，蛋白胨10g，氯化钠8.5g，卵磷脂2.0，蒸馏水1000ml）：用于含氯已定的手消毒。 4、无菌肉汤增菌液:用于未消毒或洗手时。 （三）手卫生监测标本采集方法 采集方法: 一、评价洗手、卫生手消毒、外科手消毒的效果 1、被检人洗手或手消毒后，在接触患者前或进行诊疗活动前采样。 2