海参主要活性物质对血管内皮细胞的保护作用及抗肿瘤活性的研究-海洋生物学专业论文.docxVIP

采用OX—LDL建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304) 采用OX—LDL建立体外培养的人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304) 损伤模型，研究3种刺参酸性粘多糖、皂苷和胶原蛋白多肽对内皮细 胞的保护作用。采用MTT法测定血管内皮细胞的增殖活性，硝酸还原 酶法测定血管内皮细胞一氧化氮合酶(NOS)活力和N0释放量，TBA法 测定细胞内MDA含量，DNA—Ladder法和Hoechst染色法检测血管内皮 细胞的凋亡。结果表明，不同浓度的酸性粘多糖和胶原蛋白多肽均能 显著抑制OX．LDL对血管内皮细胞的损伤，促进血管内皮细胞细胞增 殖俨0．05，P0．01)，降低细胞内MDA含量(P0．05，P0．01)，促进 血管内皮细胞NO释放量(PO．05，P0．01)，提高细胞NOS活力 泸O．05，P0．01)，拮抗OX．LDL引起的血管内皮细胞凋亡。日本刺参 皂苷能促进血管内皮细胞细胞增殖俨O．05，P0．01)，降低细胞内 MDA含量妒O．05，P0．01)，拮抗OX．LDL引起的血管内皮细胞凋亡； 菲律宾刺参和北极刺参皂苷均能降低细胞内MDA含量伊O．05， P0．01)，但其对正常血管内皮细胞的增殖活性有显著性抑制(PO．05， P0．01)。提示刺参酸性粘多糖和胶原蛋白多肽对氧化损伤的内皮细 胞具有显著的保护作用，对刺参抗动脉粥样硬化功效具有主要贡献； 酸性粘多糖效果优于胶原蛋白多肽。日本刺参皂苷对对氧化损伤的内 皮细胞有一定的保护作用，而菲律宾刺参和北极刺参皂苷对内皮细胞 有细胞毒作用。 采用MTT法检测刺参酸性粘多糖、皂苷和胶原蛋白多肽对体外培 养的癌细胞株(Hela、S180、Caco一2和P388)增殖活性的影响。结 果表明，3种刺参皂苷均能显著性抑制Hela、S180和Caco一2的增殖 活性(_PO．01)；酸性粘多糖可显著性抑制Caeo．2的增殖活性(P0．05， P0．01)；胶原蛋白多肽对肿瘤细胞增殖活性无显著影响。提示刺参 皂苷具有较为广泛的细胞毒性，酸性粘多糖对肿瘤细胞的增殖有选择 性的抑制。 关键词：海参； 酸性粘多糖； 皂苷；胶原蛋白多肽； 脂质代谢； 抗氧化； 动脉粥样硬化； 血管内皮细胞； 凋亡； 抑瘤； Protect；ve Protect；ve effects on vascuIar endotheI．aI celIs and anti_tumor actiVitities of main bi0一active Const i tuents from sea cucumbers Abstract Sea eucurnbcrs are important food and drug Resources from ocean,contain many bioaetive constituents like polysaecharides，lriterpene glycosides and collagen polypepfides．Take Apostichopusjaponicus，Pearsonothuria graeffei,Thelenata anax 勰research oNeeg extract polysaecharides口S)，lriterpene glycosides(TrG)and collagen polypeptides(CP)from these sea cucumbers body wall，investigate and compare the effects of di侬船m species of sea cucumbers fill the level of blood Hpid and peroxidation in hyperlipidemia mrs．protective effects Oil vasclllar endothelial cells and anti—tumor activitifies ofthese 3 kinds ofbioactive Constituents，to evfluate sea cucumbers and the 3 main bioactive ingredients systematicly in nutritional effectiveness，provide scientific basis for the rational exploitation and utilization of sea cucumbers． Hyperlipemia model rats were established by fed with hi曲缸diet,and 3 spe