第十三章 基的转录、转录后加工及逆转录.pptVIP

◆转录、复制的异同点 复制 二股链均复制 dNTP A-T、G-C DNA聚合酶 DNA 转录 基因的模扳链 NTP A-T、T-A、G-C RNA聚合酶 mRNA/tRNA/ rRNA ◆几个基本概念 结构基因(structure gene) 模板链(template strand) Watson(W) 链、负(-)链(minus strand)、 反意义链(antisense strand) 编码链(coding strand) Crick(C)链、正(+)链(plus strand)、 有意义链(sense strand) 不对称转录(asymmetric transcription) 结构基因(structure gene)： DNA分子中能转录出RNA的区段。 模板链：反意义链（antisense，(-)链）—— 以该链中的DNA碱基顺序指导RNA的合成即被转录的那条DNA链。 5’-----GCAGTACATGTC-----3’编码链 DNA 3’-----CGTCATGTACAG-----5’模板链 5’-----GCAGUACAUGUC-----3’ mRNA N ------Ala--Val--His--Val------C 蛋白质 不对称转录 1.DNA双链上，一股链可转录，另一股不转录。2.有意义链与反意义链并非固定不变。3.转录方向都是5’ 3’ 第一节 参与转录的酶 RNA聚合酶——依赖DNA的RNA聚合酶（DNA-dependent RNA polymerase,DDRP） 以DNA为模板，催化2个游离的NTP 形成3’，5’-磷酸二酯键 一、原核生物RNA聚合酶 1、大肠埃希菌RNA聚合酶的组成 （1）全酶(holoenzyme) 由4种(5个)亚基α2ββ’σ组成 （2）核心酶(core enzyme) α2ββ’ ，参与转录的全过程 （3）σ亚基 亦称σ因子（σ factor)—转录辅助因子 识别启动子，不参与转录过程 亚基 α2 β β’ σ 全 酶 核 心 酶 二、真核生物RNA聚合酶（三种） 类型 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 第二节? 转录过程 (起始、延长、终止) DNA模板  启动子（promoter）1、概念:转录开始时能与RNA全酶结合的DNA顺序（双链）2、原核生物启动子的特点:(1)DNA序列在转录起始点的5’端区(上游区)(2)-10bp处 -TATAAT- (Pribnow box)(3)-35bp处 -TTGACA- σ因子 RNA聚合酶中识别及结合启动子的亚基，延长时脱落，不参与转录过程，是转录辅助因子。 σ因子识别位点：启动子-35区、-10区 原核生物有多种σ因子 一般情况下起作用的是---σ70 σ70 有四个保守区域： 第2区域、第4区域和-35区和-10区结合 结合过程： 闭和的启动子复合体 RNA聚合酶（全酶）中的σ因子在DNA双链 上迅速、随机滑动，寻找到启动子-35区， 形成疏松的复合物，DNA双链未解开。 开放的启动子复合体 RNA聚合酶（全酶）移向-10区和转录起始 点在-20区DNA双链解开12-17bp时的启动子 复合体。 2、真核生物的起始 较原核生物复杂 ◆顺式作用元件 (启动子/增强子) ◆转录因子(transcription factor,TF) RNA聚合酶Ⅱ所需的转录因子 ---转录因子Ⅱ （TFⅡ） ◆真核生物启动子（1）DNA序列在转录起始点的5’端区(上游区)（2）-25bp ：TATA盒（Hogness box） （3）-90bp ：GC盒（4）-70bp ：CAAT盒  RNA聚合酶Ⅱ催化的转录起始 RNA聚合酶Ⅱ催化各种前体mRNA的合成 需要多种TF参与：TFⅡA-J 真核生物转录起始复合物的组装 启动子TATA盒+ TFⅡD +D-A复合物(TFⅡD+ TFⅡA) + TFⅡB +(RNA聚合酶+ TFⅡF)复合物 +TFⅡE 、TFⅡJ +TFⅡH（解旋酶、蛋白激酶） DNA解旋、RNA聚合酶C-端Ser磷酸化