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第三章 污染物的生物效应检测 本章将讨论以下内容 生物测试及方式 一般毒性试验 生物的分子和细胞水平检测 生物致突变、致畸和致癌效应检测 微宇宙法 第一节 生物测试及方法 一、生物测试（Bioassay）的概念、特点： 1、概念：指系统地利用生物的反应测定一种或多种污染物或环境因素单独或联合存在时所导致的影响或危害。 注释1：所利用的生物反应包括分子、细胞、组织、器官、个体、种群、群落、生态系统各级水平上的反应。 注释2：生物测试不同于常规的物理、化学检测。前者能够测定污染物对生物机体的影响，而后者只能测定污染物的浓度。 2、特点：长期、综合 3、生物测试的结果可表明（以水环境为例）： 环境状况对水生物的适合度（最适、耐受、生存） 环境因素的作用强度 环境因素对毒物的影响 毒物对受测生物的毒性 水生物对污染物的敏感性 废水处理的效果 污染物允许排放量 有关水质标准和排放许可的验证 二、方式 三、受试生物 1、应满足的条件 受试生物敏感性 广泛的地理分布和足够的数量 重大生物学价值 易于在实验室培养 丰富的生物学背景资料 反应可测 经济及旅游价值 2、还应考虑到受试生物的个体大小和生活史的长短，以前是否有过接触待测试物等异常情况。 四、生物测试的标准化 1、影响生物测试结果的因素：受试生物；试验条件；实验室差异 2、测试方法标准化的优点：实验可比性；重复性；精确性；可靠性 第二节 一般毒性试验 一、基本概念 1、毒物（Toxicant）的概念 一定条件下，较小剂量即可引起不良生物反应的外来化学物质。 2、中毒（Intoxication） 生物体受到毒物作用引起功能或器质性改变后出现的疾病状态称中毒。 3、毒性（Toxicity） 指有毒物质接触或进入机体后，引起生物体的易感部位产生有害作用的能力。 4、无损害作用：可逆的生物学变化，不引起机体形态、生长发育和寿命的改变。 5、损害作用：不可逆的生物学变化，对某些环境因素不利影响的易感性增强，代谢速度降低和酶系的相对活力发生异常改变。 6、效应（Effect） 也称为作用，对个体而言，指接触一定剂量化学物后，使机体产生的生物学改变。 7、反应（Response） 对群体而言，指接触一定剂量化学物后，产生某种效应并达到一定强度的个体在群体中所占的比例。 8、剂量－效应关系和剂量－反应关系 剂量－效应关系曲线：以剂量为横坐标，以表示效应强度的计算单位为纵坐标 剂量－反应关系曲线：以剂量为横坐标，以表示反应的百分率或比值为纵坐标 不同的化学物或同一化学物在不同条件下，其剂量与效应或反应的相关关系不同，可呈现不同类型的曲线（见图3-1，3-2，3-3，3-4）。 9、危害性（Hazard）：有毒物质在与机体接触或使用的过程中，有引起中毒的可能性。与风险（Risk)相近 10、危险性：某化学物质在正常生产和使用条件下，能引起机体发生中毒的可能性。偏重物质本身性质（与“毒性”相近）。 二、常用毒性试验参数 1、致死剂量/致死浓度：LD/LC 表示一次染毒后，在一定时间内引起受试动物死亡的剂量或浓度。 绝对致死剂量/浓度（LD100、LC100） 半数致死剂量/浓度（LD50、LC50） 最小致死剂量/浓度（MLD、MLC） 最大耐受剂量/浓度（LD0、LC0 ） 2、无作用剂量（NOED: Maximum No－effect Level） 随实验方法的改进而变化（降低） a、最大无作用剂量（MNEL: Maximum No－effect Level ） 每日容许摄入量（Acceptable Daily Intake） 最高容许浓度（Maximum Allowable Concentration） b、最小有作用剂量（MEL: Minimal effect Level ） 3、毒作用带：一种根据毒性和毒性作用特点综合评 价外来物危险性的指标。是对LD50的补充。 急性毒作用带（Acute－toxic Effect Zone） 慢性毒作用带（Chronic －toxic Effect Zone ） 4、半效应浓度：在一定时间内，引起50%受试生物的某种效应变化的浓度。只有同种效应才能比较。 5、半数抑制浓度：常用于对生长速率和活性的抑制。 6、毒物单位与分级： mg/L, mg/kg, mg/m2 分级：按急性毒性，人为分级。与染毒方式有关。 三、急性毒性试验（Acute Toxicity Test） 只研究结果，不研究机理，目的是找出造成某特殊急性效应的剂量，为进一步开展其他毒性实验提供设计依据。 1、急性毒性试验类型 哺乳动物急性毒性试验（大小