14章3-抗生素环境毒理学.pptVIP

DNA加合物为诊断、分析为污染物的暴露提供了有效的信息。一些数据可提供化学物代谢及加合物修复方面的信息。 抗生素类污染物能干扰DNA的复制、修复等正常活动, 可能会导致遗传变化，如DNA甲基化。 许多事实证明，DNA甲基化是遗传学变化的指示器, 其可能是引起体细胞突变的基本作用。基于这一点, 它很可能会引起从单一点突变到染色体断裂或多倍体这样的染多倍体这样的染色体组突变。 四、抗生素的分子生态毒理研究进展 DNA 链断裂也属DNA 损伤。很多物质能够引起DNA 链直接断裂, 比如污染物代谢生成的自由基和去碱基位点, 能够引起DNA 分子内磷酸二酯键的断裂。当动物细胞遭受持续的氧化应激、脱嘌呤作用和内源亲电子受体如环氧乙烷的作用, 就会产生DNA 损伤。 四、抗生素的分子生态毒理研究进展 DNA 链断裂的经典研究方法 主要有单细胞微凝胶电泳技术、微核测定法等。随着分子生物学技术的飞速发展, 出现了一系列以聚 合酶链式反应为基础的、在分子水平上检测污染物质导致生物体DNA 损伤的DNA 指纹技术，如功能基因组学、转录组、蛋白质组学和代谢组学等, 这些技术与检测基因突变、染色体畸变和损伤为主的经典研究方法如彗星分析、微核实验等相比，简便、快速、灵敏。 四、抗生素的分子生态毒理研究进展 五、环境中抗生素的检测技术 样品的检测技术主要有 微生物法、 薄层色谱法(TLC)、 高效液相色谱法 (HPLC)、 液相色谱－质谱联用法(HPLC/MS) 酶联免疫法(ELISA) 毛细管电泳(CE) 1、微生物法 微生物检测法是抗生素残留检测的传统方法，在过去大部分时间内在抗生素的检测中占主导地位。 微生物检测方法的主要原理是根据抗微生物药对特异微生物的抑制作用来对环境中残留的抗微生物药进行定性或定量的检测。 微生物法具有前处理简单、经济、批量大等优点，但灵敏度较低、耗时较长、操作较复杂，易受到其他抗生素的干扰，缺乏专一性和精确度，此方法并不常用 五、环境中抗生素的检测技术 2、薄层色谱法 薄层色谱法是Kirchner 等在20 世纪50 年代从经典柱色谱法及纸色谱法基础上发展起来的一种色谱技术。 按涂布薄层固定相的性质可分为吸附薄层色谱、表面分配薄层色谱、离子交换薄层色谱和薄层电泳。 薄层色谱法常作为样品筛选方法，不需要特殊设备，方法简单、快速、直观，有利于现场应用。但其前处理复杂、灵敏度低、重复性差。 五、环境中抗生素的检测技术 3、液相色谱法 高效液相色谱HPLC是目前广泛应用的一种理化检测方法，它引入了气相色谱理论，在技术上采用了高压泵，高效固定相和高灵敏度检测器，实现了分离速度快、效率高和操作自动化。 五、环境中抗生素的检测技术 几乎所有的化合物包括高极性/离子型待测物和大分子物质，均可用HPLC进行测定。HPLC的分离机制与常规柱色谱相同，但填料更加精细，需高压泵推动，柱效高(105塔板/m)、速度快、灵敏度与GC相近。最常用的检测方式为浓度型的紫外检测器和荧光检测器。 五、环境中抗生素的检测技术 4、液相－质谱联用技术 液相色谱- 质谱联用技术兼具HPLC 的强分离能力，同时又具有MS 的高灵敏度和极强的定性鉴定能力，是目前检测复杂基体组织中痕量抗生素发展最迅速的分析手段之一。HPLC-MS 的接口部件为电喷雾离子源，正电荷模式，产生的主要质谱离子峰为（M+H）+或（M+Na）+，可用此峰进行定量分析，以其他碎片峰定性确定残留物的结构。 五、环境中抗生素的检测技术 另外在液相色谱- 质谱联用技术已经发展高效液相色谱－串联质谱法，国内外利用此技术同时检测土壤中氟喹诺酮类、四环素类和磺胺类18种抗生素。土样经SAX-HLB 串联小柱净化集，在HPLC/MS/MS 多反应监测模式下进行定性及定量分析。 五、环境中抗生素的检测技术 5 、酶联免疫法 酶联免疫法是20 世纪70 年代发展起来的一项新的免疫学技术，它将酶促反应的高效率和免疫反应的高效专一性有机地结合起来，可对各种微量有机物进行测定，具有灵敏度高、特异性强、方便快速、对仪器设备要求不高的优点。 五、环境中抗生素的检测技术 6、 毛细管电泳法 毛细管电泳是20 世纪80 年代中后期迅速发展起来的一类以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动力的新型液相分离分析技术。毛细管电泳具有高效、快速等优点。 五、环境中抗生素的检测技术 六、水中微量抗生素的去除 （一）常规处理工艺对微量抗生素的去除 离子交换/