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目的研究天参益智胶囊对-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆的影响,探讨其抗衰老的作用及机理。 方法采用水迷宫进行行为学测试,以-,,,,为指标,观察其对衰老小鼠学习记忆的影响。 结果不同剂量的天参益智胶囊均能提高小鼠学习记忆成绩,使小鼠血清中-,及活性升高,活性及含量降低。 结论天参益智胶囊对-半乳糖所致衰老小鼠的学习记忆能力下降有明显保护作用,其作用机制可能与其抗氧化和抑制乙酰胆碱酯酶作用密切相关。 天参益智胶囊-半乳糖学习记忆衰老天参益智胶囊是在中医抗衰老经验方的基础上研制而成,该复方由天麻、人参等药材组成,具有补气健脑、扶正固本、开窍益智等功能。 本论文旨在探讨该复方对抗衰老、改善记忆的作用机制,选用了-半乳糖衰老动物模型,采用水迷宫实验进行行为学测试,检测体内相关指标以验证其疗效并阐明其可能的作用机制。 一、材料与仪器11动物昆明种小鼠,雌、雄各半,体重22±2,由贵阳医学院实验动物中心提供,合格证号黔2004-0001。 普通饲料饲养,清洁级,光照时间1212,室温22~23℃。 12仪器水迷宫;2000图像分析系统成都泰盟公司产品。 13药品与试剂天参益智胶囊由贵阳医学院药学院分析化学教研室提供;-半乳糖美国公司;健脑胶囊青岛国风药业股份有限公司。 二、方法21动物分组、造模方法及给药方案昆明种小鼠雌、雄各半进行水迷宫实验,直到定向航行实验成绩稳定为止连续两天成绩差异无显著性。 将经水迷宫筛选合格的84只小鼠随机分为6组=14,分别为正常对照组14?-1、模型组14?-1、复方高、中、低天参益智胶囊152,061,030?-1剂量组及阳性对照组健脑胶囊,003?-1。 除正常对照组外,其余各组均采用皮下注射5%-半乳糖溶液05?-1造模,然后连续灌胃给药45。 22水迷宫行为测试水迷宫由圆形水池、安全岛和记录系统3部分组成。 水池直径130,高60,水池内壁涂成乳白色。 池中水深30,水温保持在24±2℃,用奶粉使池水浑浊。 池壁标记4个入水点,将水池分为四个均等的象限,池壁上固定位置贴有一幅画作为参照物。 安全岛置于第1象限中点,直径10,高28,距水面2。 记录系统为成都泰盟公司提供的2000系统的行为学检测模块。 从第39天开始进行定位航行实验,连续测试5。 将小鼠从安全岛之外的3个象限任一入水点面向池壁放入置有安全岛的水池中,经2000图像处理系统自动记录小鼠在120内找到安全岛的时间逃避潜伏期和游泳路径搜索距离,并让小鼠在岛上停留10。 超过120找不到安全岛的记为120,并引导小鼠上安全岛。 定位航行实验结束后,间隔1天,拆除安全岛,将小鼠从同一入水点放入池中,记录小鼠在120内寻找安全岛过程中在原安全岛所在象限内的搜索时间空间探索时间及探索距离。 23生化指标测定行为学测试结束后,小鼠眼眶采血,分离血清,测定小鼠血清中-,,,活性及含量。 24统计学处理数据处理采用±表示,组间均数比较采用方差分析和检验。 三、结果31对-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆能力的影响对比模型组和给药组小鼠空间探索实验成绩,显示小鼠给药后学习记忆水平提高,探索时间缩短、探索距离减小,与模型组比较有显著性差异32对-半乳糖所致衰老小鼠血清中-和活性及含量的影响模型组小鼠血清中-和活性降低,含量升高,与正常对照组有显著性差异33对-半乳糖所致衰老小鼠血清中和活性的影响模型组小鼠血清中活性降低,活性升高,与正常对照组有显著性差异四、讨论本实验用水迷宫观察了天参益智胶囊对-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆的影响。 结果表明,天参益智胶囊明显改善了该模型小鼠的学习记忆能力,表现为明显缩短了空间探索实验中小鼠的探索时间和探索距离。 -和是体内重要的抗氧化酶类,在机体抗氧化损伤中起着重要作用。 是体内自由基对不饱和脂肪酸引发的脂质过氧化反应的最终分解产物,其含量的多少可以反映体内自由基的多少及其反应强度。 含量的增加可能是体内自由基生成异常或机体抗氧化保护系统的抗氧化能力减弱。 天参益智胶囊明显提升了-半乳糖所致衰老小鼠血中这两种酶的活性,同时降低了该模型小鼠血中的含量,说明其具有较明显的抗氧化活性。 中枢胆碱能系统与学习记忆功能密切相关。 本研究显示天参益智胶囊能显著提高-半乳糖所致衰老小鼠血中活性,抑制活性,提示天参益智胶囊改善中枢胆碱能系统功能是其增强模型小鼠学习记忆能力的基础。 以上实验结果提示天参益智胶囊抗衰老的作用机制与其抗氧化作用和乙酰胆碱酯酶抑制活性有关。 [1]陈奇中药药理研究方法学[]北京人民卫生出版社,200433[2],,,[]
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