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-基因与基因工程;;;基因的概念; ;在孟德尔以前，人们看到遗传现象，猜想遗传是有规律的，甚至在农牧业育种中实际运用了遗传规律，但是，一直找不到研究遗传规律的恰当方法。;孟 德 尔 (1822-1884); ;1.孟德尔遗传因子;豌豆杂交操作;孟德尔学说的重要意义;大多数生物体通常由 一对遗传因子（后来称为两个等位基因）控制同一性状。这样的生物体称为 2n 个体。 遗传因子可以区分为显性和隐性。 控制不同性状的遗传因子是各自独立的。;孟德尔提出了杂交、自交、回交等一套科学有效的遗传研究方法，来研究遗传因子的规律。孟德尔创立的这套方法一直沿用到 1950s，才被分子遗传学方法取代。;基因是一段 DNA 序列;基因在染色体上; 摩尔根实验室用果蝇为材料的工作，确定了基因在染色体上的分布规律（基因的连锁与互换定律）。;果蝇有 4 对染色体;2.基因位于染色体上;野生果蝇没有现成的成对性状 摩根在长期饲养中找到各个性状的突变株。;减数分裂时发生：染色体交叉/基因重组。;g－ 身体;3.染色体与DNA的关系;同源染色体分别带着控制; 遗传物质是 DNA;肺炎双球菌有多糖荚膜;可致病的S型;;分别用放射性同位素标记噬菌体;;华生和克里克提出 DNA 双螺旋模型。;DNA双螺旋模型;DNA的半保留复制;半保留复制;证实半保留复制的实验;4.从DNA到蛋白质;5.DNA与性状;基因在遗传中的作用;显性基因 显性性状 隐性基因 隐性性状 致死基因 致死作用;基因理论中的许多复杂情况; 一个基因一个性状？不一定。例如肤色的控制至少有三个基因参与。 基因决定性状，环境还起不起作用？在基因型确定的基础上, 环境常常会影响表型。;人的肤色至少由三个基因控制;产生黑色素的酶在较 高温度下失活，所以毛色在端点位置体温较低处呈黑色;; DNA作为遗传物质的功能;中心法则 遗传信息储存在DNA中，DNA通过转录生成 mRNA，mRNA再通过翻译生成蛋白质，从而完成遗传信息的表达过程。;;细菌细胞（原核）的基因表达;动物植物（真核）细胞中的基因表达; 什么是基因工程; DNA重组技术的基本工具; 基因工程技术的基本工具;基因操作的工具;（1）限制酶??? ;限制酶的识别特点;（2）DNA连接酶??? ; ①作用：将外源基因送入受体细胞。 ②具备的条件： 能在宿主细胞内复制 并稳定地保存。???????????????具有多个限制酶切点。???????????????具有某些标记基因 对受体细胞无害 ③举例：质粒、噬菌体 和动植物病毒。??? ; 基因工程的基本操作; ;（2）目的基因的扩增;PCR —— 把寻找目的基因和扩增目的基因两步操作并成一步。;P C R 操作流程;（3）构造重组 DNA 分子;用质粒 构建 重组DNA分子;用噬菌体DNA构建 重组DNA分子;（4）转化/转染;（5） 目的基因表达及蛋白质分离; 重组 DNA 分子进入寄主细胞后，其中的目的基因能否表达，表达效率高低，还有很大差别。表达通常是指目的基因编码的蛋白质合成。基因工程的最后一步，是把所获得的蛋白质分离纯化，得到蛋白质产品。;基因工程的 基本操作程序;; 基因工程的应用;抗逆转基因植物;工程菌;生产基因工程产品的;;在医学上的应用 基因工程被用于大量生产过去难以得到或几乎不可能得到的蛋白质－肽类药物。;胰岛素 1000 磅牛胰 10 克胰岛素 200 升发酵液 10 克胰岛素; 提高奶酪产量;哺乳小牛 凝乳酶基因 胃 转入啤酒酵母 凝乳酶 凝乳酶 制造奶酪; 转基因动物和植物;转基因植物获得新的性状;把大鼠生长因子转入小鼠; 工程菌在环境工程中应用;喷洒工程菌清除石油污染 ;无冰晶细菌帮助草莓抗霜冻; 蛋白质工程的崛起; 蛋白质的改造;二、蛋白质工程的基本原理;蛋白质工程的途径;讨论：某多肽链的一