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第六章章节酶工程制药

第六章 酶工程制药 第六章 酶工程制药 本章内容 概述 酶的来源和生产 酶和细胞的固定化 固定化酶和固定化细胞的反应器 酶工程在医药工业中的应用 酶工程研究的进展 一、 概述 酶的特性:酶是生物催化剂,大多数酶的本质是蛋白质,有些酶是核酸。 酶除具有一般催化剂的共性外,还有其特有的特点: 催化效率高; 专一性强; 反应条件温和; 酶的催化活性受到调节和控制。 酶的分类 1961年按酶所催化的反应类型将酶分成6大类: 氧化还原酶类; 转移酶类; 水解酶类; 裂合酶类; 异构酶类; 合成酶(或称连接酶)类。 什么是酶工程? 酶工程是酶学和工程学相互渗透结合、发展而形成的一门新的技术科学。 它是从应用的目的出发研究酶、应用酶的特异性催化功能,并通过工程化将相应原料转化成有用物质的技术。 酶工程学的发展历程 20世纪20年代初:酶工程名称出现于自然酶制剂在工业上的大规模应用; 1953年,羧肽酶、淀粉糖化酶、胃蛋白酶和核糖核酸酶等用重氮化聚氨基聚苯乙烯树脂进行固定。 1969年,固定化酶技术拆分DL-氨基酸 1971年,1st国际酶工程会议:酶的生产、分离纯化、酶的固定化、酶及固定化酶的反应器、酶及固定化酶的应用等。 现代酶工程的研究内容 从现代观点来看,酶工程主要有以下几个方面的研究内容: 酶的分离、提纯、大批量生产及新酶和酶的应用开发; 酶和细胞的固定化及酶反应器的研究(包括酶传感器、反应检测等); 酶生产中基因工程技术的应用及遗传修饰酶(突变酶)的研究; 现代酶工程的研究内容 酶的分子改造与化学修饰、以及酶的结构与功能之间关系的研究; 有机相中酶反应的研究; 酶的抑制剂、激活剂的开发及应用研究; 抗体酶、核酸酶的研究; 模拟酶、合成酶及酶分子的人工设计、合成的研究。 二、酶的来源和生产 酶的来源 :酶普遍存在于生物体中,可直接从生物体中分离。 化学合成方法目前还不成熟。 早期是以动植物为原料进行提取,由于动植物生长周期长、来源有限、受地理、气候和季节等因素的影响,不适于大规模生产 。 目前工业化生产一般以微生物为主要来源。 微生物生产酶的优点 微生物种类繁多,动植物体内的酶在微生物中几乎都可以找到; 繁殖快、生产周期短、培养简便、并可以通过控制培养条件来提高产量; 微生物具有较强的适应性,通过各种遗传变异手段能培育出新的高产菌株。 酶的生产菌 对菌种的要求: 1、产酶量、酶的性质、最好是胞外酶; 2、不是致病菌; 3、稳定,不易产生变异退化,不易感染 噬菌体; 4、能利用廉价的原料,发酵周期短,易 于培养。 生产菌的来源 菌种保藏机构、有关研究部门获得; 从自然界中分离筛选(土壤、深海、温泉、火山、森林都是菌种采集地),筛选包括菌样采集、菌种分离、初筛、纯化、复筛、生产性能鉴定。 生产菌的改良,基因突变、基因转移、基因克隆。 常用产酶微生物 大肠杆菌:一般属于胞内酶,需要经过细胞破碎才能得到。工业上用于生产谷氨酸脱羧酶、天冬氨酸酶、苄青霉素酰化酶、?-半乳糖苷酶等。 枯草杆菌:a-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖氧化酶、碱性磷酸脂酶。 青霉菌:葡萄糖氧化酶、青霉素酰化酶、脂肪酶、葡萄糖氧化酶、凝乳蛋白酶等。 常用产酶微生物 黑曲霉:有胞外酶和胞内酶,糖化酶、a-淀粉酶、酸性蛋白酶、葡萄糖氧化酶、脂肪酶、纤维素酶。 米曲霉:糖化酶和蛋白酶,在传统的酒曲和酱油曲中得到广泛应用。 木霉:纤维素酶,含有较强的17a -羟化酶,常用于甾体转化。 根霉:糖化酶、a-淀粉酶、转化酶、酸性蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶,含有较强的11a-羟化酶,常用于甾体转化。 常用产酶微生物 链霉菌:葡萄糖异构酶、青霉素酰化酶、纤维素酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶,含有丰富的11a-羟化酶,可用于甾体转化。 啤酒酵母:酿造啤酒、酒精、饮料酒和面包制造。可生产转化酶、丙酮酸脱羧酶等的生产。 植物细胞:大蒜-超氧化物歧化酶、木瓜-木瓜蛋白酶、菠萝-菠萝蛋白酶。 三、酶和细胞的固定化 酶反应几乎都在水溶液中进行,属均相反应,自然简便,但缺点是游离酶只能一次性使用,不仅造成酶的浪费,而且会增加产品分离的难度和费用,影响产品的质量; 另外溶液酶很不稳定,容易变性和失活。 酶和细胞的固定化 将酶制剂制成既能保持其原有的催化活性、性能稳定、又不溶于水的固形物,即固定化酶,则可象一般固定催化剂那样使用和处理,就可以大大提高酶的利用率。 与酶类似,细胞也能固定化,固定化细胞既有细胞特性和生物催化的特性,也具有固

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