GBT 水质 物质对蚤类(大型蚤) 急性毒性测定方法.ppt

GB/T 水质 物质对蚤类(大型蚤) 急性毒性测定方法 应用范围 水质与蚤类关系 试验原理 试验器材 试验过程 结果计算 实验报告 试验意义 范围： 蚤类毒性试验资料应用广泛，适用于测定化学物质、工业废水、生活废以及地表水、地下水等样品生物毒性，评价受试物对水生生物和水生生态系统的影响，以及废水和河流的环境监测。例如，蚤类急性毒性试验已成为我国农药、化学品环境安全评价，船舶散装运输液体化学品的危害性评价和污染分类，以及废水监测的重要方法，也是我国制定渔业水质标准、工业废水排放标准，以及饮水水源标准的重要依据。 蚤类与水质关系 在自然水域中生存着大量的浮游动物，蚤类是浮游生物的重要类群。它们与水环境有着错综复杂的相互关系，对水中毒性物质十分敏感，在水质变化中起着重要作用，研究认为根据浮游生物毒性试验结果可确定水质污染程度。 试验原理 蚤类毒性急性试验基本原理是利用蚤类在不同浓度受试物中短期（常用24h或48h）暴露后产生的中毒反应。以50%受试蚤的活动能力受到抑制（包括死亡）给出半抑制浓度值EC50（半致死浓度LC50）.节菱孢毒性培养物能引起试验蚤类死亡，浓度为18 mg/L的试验液中暴露24h死亡率为6.7%，48h的死亡率为30%，LC50值分别为38.07 mg/L、24.37mg/L,被测物浓度与抑制率（死亡率）之间的存在极显著的相关关系。 试验容器和仪器 试验过程 一.正式试验之前，为确定试验浓度范围，必须先进行预备试验。 二.试验浓度的设计，根据预试验的结果确定正式试验的浓度范围，按几何级数的浓度系列(等比级数间距)设计5-7个浓度。试验浓度要设计合理，浓度系列中以能出现一个60%左右和40%左右大型蚤运动受抑制或死亡的浓度最为理想 三.试验用100 mL烧杯(或结晶皿)。装40~50 mL试验液，置蚤10个。每个浓度至少有2~3个平行。一组试验液设一空白时照，内装相等体积的稀释水.试验前要用化李方法测定试验液的初始浓度。 试验开始后应于1,2,4,8,16及24 h定期进行观察，记录每个容器中仍能活动的水蚤数，测定0~100%大型蚤不活动或死亡的浓度范围，并记录它们任何不正常的行为.在计算试验蚤的不活动或死亡的百分数之后，立即测定试验液的溶解氧浓度。 检查大型蚤的敏感性及试验操作步骤的统一性，定期测定重铬酸钾的24 h- EC50 , 目的是验证大型蚤的敏感性。在试验报告中报告24 h- EC50。重铬酸钾的24 h- EC50为0.5~1.2 ppm(20°C条件下)。 如果重铬酸钾的24 h- EC50在0. 5~1.2 ppm以外，则应检查使用试验步骤是否严格，并检查大型蚤的培养方式。如有必要，使用新的符合敏感要求的大型蚤品种. 结果计算 EC50(LC50)的估算 试验结束，计算每个浓度中不活动的大型蚤或死亡蚤占试验总数的百分比，用概率单位目测法，计算EC50(或LC50)。也可用计算机EC5O(或LC50)程序处理(寇氏修正法)，获得EC50(或LC50)。 试验结果的有效性 符合下列条件的试验为结果有效。 a.对照组试验未出现不活动大型蚤. b.重铬酸钾的24 h- EC50在20℃时为0. 5--1.2 ppm的范围内。 c.试验结束时溶解氧浓度必须大于或等于2 mg/L. d、必须经检测证明被测定的试验物质浓度保持于试 验全过程 ( 至少应为计划配制浓度80%)。 如果浓度偏差20%.应以测试浓度结果为准。 试验报告 试验报告要求包括以下几个方面: a。实验蚤的种名、来源、数目、蚤龄、饵料、驯养时 间，对照组是否发生死亡。 b。被测物质的化学性质、来源、样品的保存方法、保存 时间及前处理方法。 c。实验用稀释水的性质。 d。试脸环境、水温,pH,DO、电导等情况. e。试验条件下大型蚤的任何不正常行为，包括中毒症 状。 f。 实脸结果、数据处理、结论、讨论。 g。方法依据及参考文献。 意义： 《水质物质对蚤类(人型蚤)急性毒性测定方法》提高实验数据互认程度，为我国水质安全提供了科学的检测方法依据，在保护生态环境，尤其是水生生态环境，减少污染物危害中具有十分重要的意义。 * * 目录 目录 目录 1。试验容器可采用100 mL小烧杯或结晶皿等玻璃制品，加盖表面皿。为防止玻瑞容器对试验物质的吸附，试验前可用低浓度试验溶液浸泡一天。试验结束后立即倒空容器，刷洗、消除