细胞生物学之笔记--第5章.doc

细胞的内膜系统与囊泡转运 第一节 内质网 #内质网膜的蛋白分析， 表明膜中含有酶至少30多种，分三种类型 ①与解毒相关的酶系 氧化反应电子传递酶系 ②与脂类物质代谢功能相关 eg 脂肪酸CoA连接酶 ③与碳水化合物代谢功能相关 葡萄糖-6磷酸酶（内质网的主要标志酶） 内质蛋白（reticulo-plasmin） #内质网的形态结构 ①膜性三维管网结构系统，基本“结构单位”-小管（ER tubular）、小泡（ER vesicle）扁囊（ER lamina）平均厚度5~6nm ②内质网向内与核膜沟通，向外与高尔基体、溶酶体等转换成分 ③同一组织细胞中，内质网的数量和结构的复杂程度往往与细胞的发育程度成正相关 #内质网的基本类型 根据电镜观察，内质网分为 粗面内质网(rough endoplasmic reticulum, RER) 和 滑面内质网(smooth endoplasmic reticulum, SER) ①糙面内质网表面有核糖体附着 多呈扁平囊状，参与分泌型蛋白质和多种膜蛋白的合成、加工和转运 分泌肽类激素和蛋白的细胞中，RER高度发达；肿瘤细胞、未分化细胞 则很少 ②光面内质网是呈表面光滑的管泡样网状形态结构 滑面内质网 与粗面内质网 相通，是多功能细胞器；在不同细胞或不同生理期，结构分布和发达程度差别很大 ※有的细胞以 RER为主，有的以 SER为主，随着生理状态改变，两者可以互相转换 ③某些特殊的组织细胞中存在内质网的衍生结构 髓样体（myeloid body）见于视网膜色素上皮细胞 孔环状片层体（annulate lamellae）出现于生殖细胞、快速增值细胞、某些哺乳动物的神经 元和松果体细胞及一些癌细胞 内质网的功能 糙面内质网的主要功能是进行蛋白质的合成、加工修饰、分选及转运 信号肽指导的分泌性蛋白在糙面内质网中合成 ①信号肽是指导蛋白多肽链在糙面内质网上合成与穿膜转移的决定因素。核糖体与内质网的结合以及肽链穿越内质网膜的转移，还有赖于细胞质基质中信号识别颗粒（signal recognition particle，SRP）的介导和内质网膜上信号识别颗粒受体（SRP-receptor，SRP-R）以及被称之为转运体（translocon）的易位蛋白质（易位子）的协助。 ②新生多肽链的折叠与装配 内质网腔中 氧化型谷胱甘肽（GSSG） 多肽链上半胱氨酸残基之间二硫键形成的必要条件 内膜腔面 蛋白二硫键异构酶PDI Protein disulfide isomerase 加快二硫键形成及多肽链的折叠速度 分子伴侣（molecular chaperone）在其羧基端有一KDEL驻留信号肽。是细胞内蛋白质质量监控的重要因子。协助蛋白质的折叠转运，本身不参与最终产物的形成。 免疫球蛋白重链结合蛋白BiP 阻止蛋白质聚集或发生不可逆变性，协助蛋白质折叠（与热激蛋白70同源） 内质蛋白endoplasmin 又称葡萄糖调节蛋白94，内质网标志性分子伴侣，参与新生肽链的折叠和转运 钙网蛋白calreticulin 在钙平衡调节、蛋白质折叠和加工、抗原呈递、血管发生及凋亡……与钙离子结合 钙连蛋白calnexin 与未完成折叠的新生蛋白质的寡糖链结合，以避免蛋白质彼此的凝集和泛素化；组织折叠尚不完全的蛋白质离开内质网，并促使其完全折叠 ③蛋白质的糖基化（glycosylation） 主要是寡糖与天冬氨酸残基侧链上的氨基团的结合，（N-链接糖基化），糖基转移酶催化，始于一共同前体-14寡糖（2个N-乙酰葡萄糖胺+9甘露糖+3葡萄糖） 最后，寡糖转移酶 催化 14寡糖链 连接到 新生肽链 的特定 三肽序列：Asn-X-Ser 或 Asn-X-Thr（X是 除Pro之外 的任何氨基酸）的 Asn上。糖基化后的 新生肽链，寡糖链末端的2个葡萄糖残基被移去，残留的葡萄糖残基结合内质网膜上的 分子伴侣，然后在 分子伴侣帮助下 完成折叠，被移去最后一个葡萄糖残基，包装外送；错误折叠 导致肽链的疏水基团 外露，被GT（监控酶）识别 并重新连接1个葡萄糖，重新结合分子伴侣 进行折叠 ④蛋白质的胞内运输。“出芽” A.转运小泡进入高尔基复合体，加工浓缩，分泌颗粒排吐到细胞外。 B.内质网膜泡→大浓缩泡→酶原颗粒→排出细胞。（仅见于哺乳类胰腺细胞） 信号肽指导的穿膜驻留蛋白插入转移的可能机制 （1）单次穿膜蛋白插入转移机制 A.新生肽链共翻译插入（cotranslation insertion） 驻留蛋白含有位于肽链N端的起始转移信号肽，停止转移信号肽（特定氨基序列，疏水区段）。当停止转移肽 进入 转运体，转运体 与之作用，从活性状态 变为 失活状态，终停止对肽链的转移，停止转移肽