铁皮石斛组培讲义知识内容.pptVIP

铁皮石斛的组织培养 第三小组 小组成员：贾静 周玉兰 郭朝慧 黄晓燕 葛亚琼 平然 付祥龙 陈曦林 （1）铁皮石斛的基本概念 （2）铁皮石斛的药用价值 （3）组培技术 二、铁皮石斛的药用价值： （1）增强免疫功能 （2）促进消化 （3）护肝利胆 （4）抗风湿 （5）降低血糖血脂降低血胆固醇和甘油三脂。 （6）抗肿瘤 （7）保护视力 （8）滋养肌肤 （9）抗衰老　 三、铁皮石斛的组培培养： 组织培养获得石斛再生植物株的途径 （1）器官发生型： 无菌短枝型(又称节培法） 芽增殖型 器官发生型 （2）原球茎发生型 器官发生型途径： 器官发生型通过外植体组织培养，使预先存在的分生组织形成芽(如腋芽)或不定分生组织(如子叶、茎段、愈伤组织等)形成不定芽。 原球茎发生型途径： 指通过石斛适宜外植体诱导产生胚性愈伤组织并增殖，随后形成类胚组织原球茎进而发育成完整的再生植株。 通常铁皮石斛采用种子及茎段为外植体进行组培快繁 种子外植体培养： 种子胚萌发→愈伤组织诱导→原球茎诱导→原球茎分化→发芽等过程 种子诱导出无菌苗的时间在20~35天之间， 种子诱导率一般为75%~90% ， ·茎段外植体培养： 茎段→丛生芽→完整植株 茎段外植体自植入培养基中10天后，其茎节部芽体就出现突起，并产生丛生芽族，不仅生长快，而且芽体粗壮。 30天后能生成健壮完整的芽体，不需要经历原球茎诱导阶段 茎段诱导率为90%~98% ； 实验材料 石斛材料：选取1 年生铁皮石斛植株上生长健壮的茎段，摘去叶片和膜质叶鞘，剪成约2 cm长带节的小段。 培养基：常用的培养基为MS。 （1）芽增殖培养基：MS＋NAA0.1～0.5毫克／升＋BA0.5～2.0毫克／升； （2）壮苗培养基：MS无激素培养基； （3）生根培养基：1/2MS+IBA0.1毫克／升 茎段外植体培养 培养基附加物： （1）天然添加物 在基本培养基中加人香蕉汁、马铃薯汁、绿豆芽汁、苹果汁仁、椰子乳等能促进铁皮石斛幼苗的生长和根系的发育，香蕉汁的促进作用最为显著。（2）炭源 铁皮石斛在生根培养时加入活性炭有利于试管苗的生长，能使根系长得更加粗壮闭。唐桂香等认为在培养基中添加活性炭有助于提高试管苗的成活率，但对苗的根数和根长影响小。 培养条件 石斛组培常用的温度为(26±1) ℃ 光强1 600～2 000 lx 日照光8~12h/d （1）组培苗在光照度为2000lx ，温度以22 ℃ 为宜。 (2) 在20 一22 ℃ 时丛生芽增殖较好，温度超过25 ℃ 丛生芽就开始分化成苗。 实验步骤： ①原材料清洗 选择生长旺盛、无病害的铁皮石斛健康植株，每2 节为一段放入500ml 的烧杯中，加入少量洗衣粉，用纱布单层棚扎杯口，然后用工程线扎紧，放在自来水龙头下冲洗30min，冲水量调整到能使铁皮石斛茎段在水中漂动为好。 主要作用是洗去外表尘土和大颗粒菌落、菌丝等。 ②材料二次消毒灭菌 将上述完成后的材料带到无菌室超净工作台上，进行二次消毒灭菌: 将茎段腋芽的苞叶拨去。 70% 的酒精速浸25s， 用0.1%的升汞溶液浸泡10min， 用无菌水冲洗5 次，灭菌过程中不断摇动烧杯使灭菌更加彻底，以去掉表面药物残留。