课件：第五节牛磺酸课件.ppt

* 与对照组细胞相比，AngⅡ组细胞生长密集，增生活跃;Tau组细胞体积较小,随药物剂量增加，细胞增殖明显受到抑制。 MTT结果表明：AngⅡ模型组细胞OD值明显高于对照组（P0.001）, 经Tau作用48h后，细胞OD值随剂量增加而依次降低，在80、160mmol·L-1剂量下与AngⅡ模型组相比OD值有显著性差异（P0.05或P0.01， Tab 1），且量效关系明显。 * 羟脯氨酸含量能反映器官纤维化的程度。AngⅡ作用24h即可明显升高TGF-β1的含量，与正常对照组比较有统计学差异（p0.001）,牛磺酸可以抑制AngⅡ对于TGF-β1的诱导作用，各剂量组均可降低TGF-β1的蛋白含量（P0.05或P0.01,Tab 1）。 * 与对照组相比,AngⅡ (10-7mo1/L)组CFs的S期细胞百分率明显增加(P0.01),G0/G1期细胞百分率则明显降低 (P0.01);牛磺酸（Tau）可剂量依赖性地逆转AngⅡ组中S期细胞百分率的升高与G0/G1期细胞百分率的下降。给予160mmol/L的Tau后，CFs的S期细胞百分率显著降低（P0.01），G0/G1期细胞百分率明显升高(P0.001)，表明Tau可使CFs受阻于G1期，显示Tau具有调控 CFs G1/S期调控点的能力。 * AngⅡ作用24h后，p27的蛋白表达阳性率降低，与对照组差异显著(P0.001). Tau作用后，p27蛋白表达阳性率较AngⅡ组增高 (Tau 160mM 组与模型组差异显著，P0.001)，显示Tau抑CFs增殖的作用可能与 p27表达提高有关. * 在AngⅡ与CFb作用3h时，AngⅡ即开始降低NO的含量，随时间延长这种作用逐渐减弱,但与同一时间点正常组比较仍具有显著的统计学差异，与此同时Tau80mM的升高NO含量的作用逐渐增强，与同一时间点模型组比较有统计学差异。 Tau对CFb细胞周期的影响 FCM分析CFb细胞周期改变 ※※ P0.01 vs control group, △P0.05 vs model group ** ** Δ Δ Δ Δ Δ Δ Δ control AngⅡ(10-7M ) Tau160mM Tau80mM Tau40mM Channels (PE-A) 0 50 100 150 200 250 Number 0 200 400 600 800 1000 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 OB model Tau40 Tau80 Tau160 % G0/G1 S Group G0/G1 （%） S（%） G1/M （%） Control 89.65士1.8 4.13士1.25 6.22士0.55 AngII 80.49士0.88※※ 12.33士1.08※※ 7.18士1.96 Tau（160） 89.46士1.01△△△ 6.47士1.88△△ 4.07士0.88 Tau（80） 82.16士0.5△ 9.97士0.73△ 6.96士0.23 Tau（40） 83.07士2.14 10.17士1.26 7.67士3.4 流式细胞仪(FCM )检测p27蛋白表达(12h) control AngⅡ Tau40mM Tau80mM Tau160mM Western blot 检测p27(12h) ※※※ △△△ △△ 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 control AngII △△△ △△ Tau40 Tau80 Tau160 ※※※ 免疫细胞化学染色法检测p27蛋白表达（10×20） 免疫细胞化学染色法检测cyclinD蛋白表达（10×20） control AngⅡ(10-7M ) Tau160M Tau80M Tau40M AngⅡ作用24h后，模型组与对照组相比，细胞增殖显著，但未见到cyclinD蛋白表达的差异。用Tau处理24h后，可见 细胞增殖随药物剂量增加而递减。经SP免疫细胞化学法染色检测发现：细胞周期正性调节蛋白CyclinD在各组均有表 达，但各组间无显著性差异(p0.05)。 control AngⅡ(10-7M ) Tau160mM Tau80mM Tau40mM 免疫细胞化学