岛津LC-20A型高效液相色谱仪操作规程——相关操作.docVIP

岛津LC-20A型高效液相色谱仪操作规程 1．实验前的准备 1.1准备所需的流动相，自动进样器用的清洗液（甲醇-水50:50），用合适的有机滤膜（0.45 μm）滤过。流动相装入溶剂储液瓶，确认吸滤头已置于液面以下。 1.2配制样品和标准品溶液，用合适的滤膜(0.45 μm)滤过。 1.3根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（连接时注意方向）。 2．开机 2.1接通电源，打开输液泵（脱气机自动打开）、检测器、自动进样器、柱温箱，顺序无关紧要；等待各仪器单元的指示灯变为绿色时进行下一步操作。 2.2 打开电脑，双击桌面“LCsolution”图标，单击“仪器1”，弹出“登录”窗口，单击“确认”，听到两声蜂鸣，表示LCsolution色谱工作站与仪器联机正常 2.3在LCSolution工作站 “仪器参数视图”中“自动排气”项进行排气时间设置，对输液泵及自动进样器进行必要的Purge操作，排出相应流路中的气泡；检查输液泵在动作前的压力显示值，必要时对此压力进行调零。 3．参数设定 点击“仪器参数视图”进入仪器参数设置界面：选中“正常”或“高级”项，分别设定“数据采集”、“LC时间程序”、“检测器A”、“柱温箱”、“控制器”、“自动进样器”等参数。 3.1“泵”参数：“模式”控制送液模式，“泵A总流速”设定流速，“溶剂B（C、D）浓度”为各相所占百分比，“压力限制（泵A）” 设置系统所能承受的压力范围，通常将“最大值”设置为18.0，“最小值”设为0。 3.2“柱温箱”参数：若使用柱温箱，则选中“启用柱温箱”复选框，在“柱温箱温度”设定柱温，“最高温度”设定最高保护温度（通常默认85 3.3“检测器A”参数：“灯”项选“D2”表示将灯打开，选“关”则氘灯关闭；“波长通道1（1）” 3.4 “数据采集”参数：选中“采集时间（检测器A）” 复选框，设置数据采集的“开始时间”和“结束时间”。 3.5 “LC时间程序”参数：如采用梯度洗脱方式，则须编辑泵梯度洗脱程序，也可以通过时间程序控制柱温箱温度，检测波长等参数。 3.6 *参数设定完毕，点击主菜单中“文件”下的下拉菜单“另存方法文件为…”保存方法文件。点击“下载”传送参数。 4．数据采集方法编辑 点击“数据采集”进入采集数据编辑方法界面；点击主菜单“方法”下的“数据分析参数（检测器A）”编辑数据分析参数，设置“半峰宽”、“斜率”、“最小峰面积”等数据积分参数。 保存方法：点击主菜单中“文件”下的下拉菜单“另存方法文件 ”保存数据分析参数。 5．平衡系统 点击“仪器开/关”（此时“泵开/关”同时开启），使仪器处于开启状态。系统开始运行，检查各单元参数应与方法设定一致，等待系统平衡。一般情况下，由于流动相不同，交换平衡时间不同。可以观察检测器输出信号变化，如果输出信号稳定不变，即认为接近平衡，可以调零等待，待基线平稳，压力稳定，系统平衡后，准备进样分析。 6．进样分析 6.1 单针进样分析：点击“单次运行”图标编辑样品参数：如“样品名”、“样品ID”等样品信息；在“方法文件”项调用本次分析的方法文件名，在“数据文件”项选择数据存储路径；填写本次分析的“样品瓶#”、“样品架#”、“进样体积”，点击“确定”后，开始进样操作。 6.2 批处理分析：点击“批处理”，出现批处理表的对话框。使用“向导”创建批处理表。单击“向导”，弹出“批处理表向导”对话框，选择“新建”批处理表，在“方法文件”项选择方法文件，选择“开始样品瓶#”、“样品架#”，输入“进样体积”，点击“下一步”；“样品组数”选择1，样品类型选择“仅未知”，点击“下一步”；输入“样品名”、“样品ID”，在“数据文件”项下选择数据存储路径，在“每组中的未知样品瓶数”项输入批处理个数，点击“下一步”；批处理向导-汇总报告不做设置，点击“下一步”；选择“关机方法文件”及“冷却时间”；点击完成，初步建立一个批处理表。在建立好的批处理表中，可以根据需要，手动更改样品信息及分析方法。单击“批处理开始”，批处理表开始运行。 7．报告编辑 7.1在“LC再解析”中，点击“LC数据分析”。进入数据后处理界面。打开一个数据文件，可以在“色谱图视图”中观察LC色谱图，在色谱图上单击右键，可以更改积分参数，调整色谱图显示方式。 7.2点击“数据报告”进入报告界面，调入报告格式文件，用鼠标将报告格式文件拖曳到右侧报告栏内。报告格式，也可以通过内容选择图标，在报告中确定位置后，添加即可。右键功能很强大，可以根据需要对报告进行修改。 8．系统清洗 数据采集完毕后，关闭检测器，继续以工作流动相冲洗20min后，（如流动相含缓冲盐，换为不含缓冲盐的同比例流动相再冲洗20min），可采用以下方式冲洗系统： 换用纯水（至少含5%的有机相）冲洗系统及色谱柱至少60min，最后