分子生物学：外源基因的原核表达1教案编写 .ppt

外源基因的原核表达;外源基因表达的作用：外源基因表达泛指目的基因与表达载体重组后，导入合适的受体细胞，并能在其中有效表达，产生目的基因产物。外源基因的表达是研究和探索基因功能、基因表达调控机制、编码蛋白质的结构与功能的重要方法，也是制备和生产新型蛋白质药物、诊断试剂必不可少的手段。通过外源基因的表达可由宿主细胞产生大量的目的蛋白。;常用的原核外源表达系统;原核生物基因表达系统的特点：;原核生物基因表达系统的特点：;大肠杆菌表达系统;大肠杆菌表达系统的主要不足;大肠杆菌基因表达载体;大肠杆菌基因表达载体;大肠杆菌基因表达载体;大肠杆菌基因表达载体;Date;大肠杆菌基因表达载体;Date;Date;终止子的功能 （1）、能能有效控制目的基因mRNA的长度 （2）、提高mRNA的稳定性 （3）、避免载体上其他基因的异常表达;大肠杆菌基因表达载体;大肠杆菌基因表达载体;基因表达的机制;基因表达的机制;目的：在细胞生长的初期不表达或低水平表达，当细胞增殖到一定的密度时，在某种特定的诱导因子的诱导下启动转录合成mRNA。;mRNA的延伸与稳定性： 有效表达的关键是：保持mRNA的 1、有效延伸 2、正确终止 3、mRNA在细胞中的稳定存在;mRNA的有效延伸：导致mRNA转录提前终止的可能原因有和解决办法 1、衰减子：类似于简单的终止子，在原核生物中一般位于操纵子的启动子与第一个结构基因之间