探析隐丹参酮对淋巴细胞药理作用.docxVIP

　　目的了解隐丹参酮对正常大鼠和胶原性关节炎大鼠细胞免疫功能的影响。 　　方法采用鸡型胶原诱导大鼠胶原性关节炎模型，采用法检测诱导的脾脏淋巴细胞、刺激的胸腺淋巴细胞增殖反应。 　　结果隐丹参酮体外用药，低浓度时对正常大鼠的淋巴细胞增殖反应具有促进作用，随着浓度的升高开始出现抑制作用；隐丹参酮低浓度时对胶原性关节炎大鼠诱导的胸腺细胞低下的免疫功能具有增强作用，高浓度时对诱导的脾细胞亢进的免疫功能具有抑制作用。 　　结论隐丹参酮对正常大鼠的免疫功能具有浓度和机能依赖性的双向免疫调节作用，对胶原性关节炎大鼠异常的免疫功能具有一定的改善作用。 　　隐丹参酮；淋巴细胞；胶原性关节炎；大鼠隐丹参酮，是从中药丹参中提取的单体化合物，有明确的化学结构19203，29635。 　　丹参作为一种传统中药在我国沿用已久，具有祛瘀止痛、活血通经、清经除烦的功效，主治冠心病、心绞痛、心烦不眠、月经不调等症。 　　研究表明，隐丹参酮对角叉菜胶引起的大鼠足跖肿胀、对蛋清引起的大鼠急性关节肿等均有明显的抑制作用。 　　本文主要观察了对正常大鼠和胶原性关节炎，大鼠胸腺淋巴细胞、脾脏淋巴细胞增殖反应的影响。 　　一、材料与仪器11动物雄性大鼠，体质量160±20，安徽医科大学实验动物中心提供，合格证号皖医实动准第01号。 　　12药物与试剂隐丹参酮，批号050428，由中山大学药学院提供；卡介苗，每支50，上海生物制品所生产；鸡型胶原，上海本草生物医学研究所产品；培养粉，美国公司产品；刀豆蛋白，、脂多糖，美国公司产品；二甲亚砜，分析纯，天津市光复精细化工研究所产品；溴化34，5?捕?甲基噻唑22，5?捕?甲苯基四氮唑四甲基偶氮唑蓝，，美国公司产品。 　　13仪器6100型2培养箱美国杜邦公司产品；20全自动高速冷冻离心机湖南仪器仪表总厂离心机厂；301美国公司。 　　二、方法21药物的配制先用无水乙醇溶解，再用无血清的培养液配制所需的5个浓度。 　　刀豆素，脂多糖分别用无血清的培养液配制。 　　22大鼠模型的建立将Ⅱ溶于01?1醋酸中，在4℃下搅拌使之充分溶解，质量浓度为2?-1，置4℃冰箱过夜，再将灭活的卡介苗置于液体石蜡中，配成05?-1的完全弗氏佐剂，将二者等体积混合、乳化，制成Ⅱ乳剂。 　　将该乳剂于大鼠的右后足趾皮内注射01致炎，第7天尾根部近13处和背部3～5点皮内注射该乳剂01作为激发注射。 　　23胸腺淋巴细胞，脾脏淋巴细胞增殖功能测定法分别取正常大鼠和致炎后35大鼠，无菌取胸腺和脾制成淋巴细胞悬液，调整细胞至终浓度为1×107，培养液培养细胞，在96孔培养板上每孔加入100μ细胞悬液，50μ终浓度5μ或终浓度6μ，50μ不同浓度的01，1，10，100，1000μ培养48，终止培养前4加入20μ5，继续培养4后加入150μ终止反应，酶标仪检测490吸光度，值，结果以3个复孔值的均值表示。 　　24统计学处理实验结果以±表示，组间差异性比较采用100统计软件计算。 　　三、结果31对正常大鼠脾细胞和胸腺细胞增殖影响由表1可知，诱导的脾脏淋巴细胞和刺激的胸腺淋巴细胞增殖较正常对照显著增强，差别有显著意义32对大鼠脾细胞和胸腺细胞增殖反应的改善作用由表2中可知，在大鼠中诱导的脾脏淋巴细胞增殖反应较正常对照显著增强；诱导的胸腺淋巴细胞增殖反应却较正常对照组明显降低，差别均有显著意义四、讨论类风湿关节炎，是一种慢性、系统性自身免疫病。 　　以关节滑膜炎为主要特征，表现在多种炎性因子的刺激下，关节滑膜细胞类肿瘤样无限增生，对关节软骨、骨造成进行性破坏，最终导致关节畸形和功能障碍。 　　到目前为止，的致病原因和发病机制尚不清楚。 　　近年的研究发现的免疫应答是一个免疫调节网络，当抗原被提呈后，细胞激活发生增殖和分化，不同的细胞亚群及单核细胞分泌不同的细胞因子。 　　这些细胞因子环境、抗原接触情况和人类白细胞抗原基因表型共同调节细胞的分化、细胞的成熟和抗体合成、抗原抗体反应以及细胞免疫的独特应答。 　　这些细胞分泌的正性调节细胞因子、炎性介质以及自身抗体使自身组织受到攻击，产生自身免疫。 　　本研究通过体外实验观察到低浓度时对正常大鼠的淋巴细胞增殖反应具有促进作用，随着浓度的升高开始出现抑制作用，表明对正常大鼠的免疫功能具有浓度和机能依赖性的双向免疫调节作用。 　　本研究表明，对大鼠异常的免疫功能具有一定的改善作用，低浓度时01μ对大鼠诱导的胸腺细胞低下的免疫功能具有增强作用，高浓度时100，1000μ对诱导的脾细胞亢进的免疫功能具有抑制作用。 　　提示可能通过改善大鼠异常的免疫功能而治疗，其进一步的作用和机制有待深入研究。 　　［1］朱蕾，魏伟，郑咏秋白芍总苷对胶原性关节炎大鼠滑膜细胞的作用及机制［］药学学