溶胶-凝胶技术固定化酶在生物传感器中的应用.pdfVIP

2009 年6 月 广西轻工业 第6 期（总第127 期） GUANGXI JOURNAL OF LIGHT INDUSTRY 食品与生物 溶胶-凝胶技术固定化酶在生物传感器中的应用 袁宁宁，陈运藻，谢鹏波，欧阳英，王丽芳，李广益 （广州工程技术职业学院，广东广州 51 0075） 【摘 要】 溶胶—凝胶技术以其高效、简便、通用性强等特点而越来越广泛地应用于生物分子的固定化，所得生物活性材料 在生物催化、生物传感、生物医学诊断等领域具有良好的应用前景。主要介绍了溶胶—凝胶法包埋生物分子的基本过程，及其在酶 生物传感器中的应用进展。 【关键词】 溶胶—凝胶；固定化酶；生物传感器 【中图分类号】 O629.8 【文献标识码】 A 【文章编号】 1003- 2673(2009)06－07 －02 现代溶胶凝胶技术的研究始于二十世纪中叶，利用溶胶和 水解、缩聚后形成凝胶网络，生物分子在凝胶形成过程中被包 凝胶制备单组分化合物。到六十年代末期和七十年代早期，由于 囊于其中。水解反应通常是在酸或碱的催化下完成的，然后再 电子学、通讯技术、能源技术及其他高技术领域对新材料的要求 存放过程中，经过几天或者几周的老化，在凝胶化反应过程中 越来越高，溶胶—凝胶技术开始进入突飞猛进的发展阶段。溶 产生的水和醇会从凝胶体系中挥发，结构发生坍塌，孔径缩小 胶—凝胶过程是指将烷氧金属或金属盐等前驱物在一定条件下 到2- 20nm，孔体积也比原来减小85%[8]。因此，从研究的结果 水解缩合成溶胶（Sol），然后经溶剂挥发或加热等处理使溶胶转 来看，大多数酶在固定化以后，它们的活性低于相同条件下溶 [1，2] [9] 化为网状结构的氧化物凝胶（Gel）的过程 ，其特点是可在室温 液酶的活性。有报道 指出，酸性磷酸酶、碱性磷酸酶及胰蛋白 或略高于室温的温和条件下将聚合物溶解在无机物的前驱体溶 酶经溶胶—凝胶法固定化后的酶活性为溶液酶活性的30% 液中, 在聚合物存在的条件下, 使前驱体水解、聚合形成SiO2 网 - 60%。Li[10]等发现，溶胶—凝胶法固定化后的乳酸脱氢酶的酶 络或使聚合物单体和无机物前驱体同步发生聚合而获得有机无 活性为溶液酶活性的10%左右。另外，底物和产物的扩散速率 [3] [11] [12] 机交织网络 。其相微区尺寸在纳米尺寸范围内, 紧密结合或相 也普遍较低 ，底物与酶的不易接触 ，影响酶反应效率。 [4] 互贯穿于小的微区尺寸, 使材料具有更高的透明性 。正是这些 优点，使sol- gel 技术在固定生物分子、生物传感器等领域，应 2 生物传感器 [5] 用非常广泛 。 生物传感器是指生物活性材料与物理换能器的结合体，它 能将生物反应信息转换为可测量的光、电等信号，从而用于物 1 固定化酶 质浓度测定或反应过程研究。传感器探头结合生物反应灵敏度 近年来生物分子固定化技