蔡锡渠—宫颈癌筛查技术--HPV12+2检测.pptVIP

蔡锡渠—宫颈癌筛查技术--HPV12+2检测 一、HPV12+2检测的意义及临床应用 * HPV的型别 目前已发现超过200种型别的人乳头瘤病毒（HPV）。 依据与生殖道肿瘤相关性，将HPV分为： 低危型 常引起外生殖道湿疣等良性病变；6、11、42、43、44等。 高危型 与子宫颈癌及子宫颈上皮内瘤变（CIN2/3）的发生相关；16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68等。 HPV分型检测的意义（1）预测受检者发病的风险度，确定最佳的治疗时期 Gary M. Clifford et al ; Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 2005;14(5):1157–64 提示：不同的高危型促进LSIL（低度鳞状上皮内病变）向SCC（鳞状细胞癌）转变的能力有差异。 HPV16，18 的致宫颈癌风险性大于其他高危型HPV。 基线筛查细胞学阴性/高危HPV阳性的女性10年内≥CIN3病变的累积发病率 Khan MJ, et al. J Natl Cancer Inst 2005; 97:1072–1079. Follow-up time (months) Other high-risk HPV+ HPV18+ High-risk HPV– HPV16+ Cumulative incidence rate of ≥CIN3 (%) 17.2% (11.5–22.9) HPV16+ 13.6% (3.6–23.7) HPV18+ 3.0% (1.9–4.2) 其它高危型 HPV阳性 0.8% (0.6–1.1) 高危型 HPV阴性 4.5 15 27 39 51 63 75 87 99 119.5 111 0 20 15 10 5 0 基线时HPV16/18阳性者相比其它12种高危HPV型别阳性者，有更高风险进展为高度宫颈病变 HPV16/18阳性的短期风险也明显高于其它致癌型HPV阳性 对204例宫颈癌患者前瞻性研究发现，HPV18型感染者是预后不良的重要指标，HPV18阳性5年存活率54.1%，而其他高危型感染的存活率为83.8%。HPV18型阳性者复发率53.6%，而HPV16型复发率仅为15.9% 51例宫颈癌手术患者中，9例发生淋巴转移中有6例为HPV18型 107例晚期宫颈癌患者放疗治疗组中，HPV18型阳性者5年存活率为15.5%，而HPV16型为73.1% 对于群体而言HPV16型感染危害最大 对于个体而言HPV18型感染危险度最高 （2）16、18亚型持续感染的危险性大于其他亚型 对巴西1611名妇女在4个月间隔2次检测HPV，HPV16，18持续阳性致HSIL风险性大于其他高危型HPV持续阳性。（Nicolas F. Schlecht, et.al. JAMA. 2001; 286(24): 3106-3114. ） 宫颈癌的必要条件 高危型的HPV感染 HPV持续感染 （3）针对不同型别的感染采取不同的处理方案 相同细胞及组织学类型HPV阳性与阴性要区别对待 不同HPV感染型别要区别对待 例如：建议HPV16,18型的患者直接进行阴道镜检查；而对于其他型别的感染，要结合细胞学诊断，一般不需要采取任何治疗方法，但需要按时随访。 44岁女性，2008年10月24日，妇检宫颈光滑，滴虫（+）HPV16，52（+），TCT：炎细胞中度。未行阴道镜检查，2010年10月18日。阴道镜下宫颈活检病理:鳞状细胞癌（中分化）。未按规范筛查及随访，导致宫颈癌发生。 广东省妇幼保健院 案 例 分 析 二、凯普HPV12+2检测试剂盒 荧光PCR原理 在PCR反应体系中有上下游引物，在荧光PCR体系中也有上下游引物，还加入了一个荧光基团-探针 在PCR扩增过程中,特异性引物和探针分别与靶序列结合，由于此时荧光基团与猝灭基团离的很近，猝灭基团对荧光基团的发光起到了抑制作用，因此荧光基团不发光。 Taq酶在引物的引导下复制靶序列；当遇到结合在两条引物之间的探针时，发挥5′端外切酶功能，将探针水解，水解下来的荧光基团受激发发射荧光，每合成一条DNA链发射一次荧光信号。 当靶序列呈指数增长时，发射的荧光信号量相应增长，因此只要标本中含相应型别的HPV病毒就会有荧光信号的积累，从而达到检测HPV DNA的目的。 荧光 猝