家禽Myostatin和OBR基因与骨骼肌和脂肪生长发育性状关系的遗传学研究-动物遗传育种学专业论文.docxVIP

#!E___I●●_l一____-●●l-__ll|_-_-I___=!I_EIl=I==II__。‘。——————————一 #!E___I●●_l一____-●●l-__ll|_-_-I___=!I_EIl=I==II__。‘。——————————一銮j!I查些盔兰翌圭兰堡笙兰 ：!!：竺一 摘要 肌肉生长抑制素是控制骨骼肌生长发育的重要细胞因子。Leptin受体OBR是l类 细胞园子家族成员，在Leptin的信号转导中起着极其重要的作用。本研究采用PCR-SSCP 和DNA测序的方法检测了Myostatin和OBR基因单核苷酸多态性，并对北京油鸡、白 耳鸡、石歧杂、矮小黄鸡、小型黄鸡、惠阳胡须鸡、隐性白羽鸡、海兰、AA鸡、肉鸡 商脂系、低脂系等不同鸡种单核苷酸多态性进行了群体遗传分析。同时利用CAU资源 家系对Myostatin基因基因型与屠体重、胸肌重、腿肌重、肝重和腹脂重等性状进行了 ：廷联分析。克隆和测序了鸭、鹅、鹌鹑、家鸽Myostatin编码区以及鸭、鹅、鹌鹑Myostatin 基因的5’．调控区；采用Northern Blot方法分析了鸭、鹅、鹌鹑、家鸽Myostaim基因 ，的组织表达特性：用RT．PCR的方法检测了蛋鸡和肉鸡不同组织中的OBR表达分布。 ／结果如下： 、‘(】)在检验的17对Myostatin基因的引物中，我们发现5对引物的扩增片段具有多态 性。5’．调控区引物P60／P61扩增片段多态性是由3个核苷酸的改变而产生的(分别是 G304A、A322G、C334T)：引物P93／P94扩增片段的多态性由G167A突变所致；引物 P117／P118PCR扩增片段多态性由C177T引起。3-调控区引物P80／P81扩增片段多态性 是由第7263位A突变为T造成的，引物P76／P77扩增片段多态性是由A6935G的点突 变造成。 (2)不同鸡种群体遗传学分析表明，5’．调控区引物P60／P6l扩增片段多态性位点在北 京油鸡的基因型频率分布与其他的品种有很大的差异，其BB基因型频率为0．700，而 AA型仅为0．033，在其它鸡种中以A基因占优势：对于引物Ix)3／P94，品种间的基因型 频率差异极显著(P0．01)，北京油鸡和AA鸡的EE型频率低于其他品种，白耳鸡和海 兰蛋鸡中EE型为主，其频率高于其他品种；3-调控区引物P80／P81多态性位点在9个 鸡种中都是等位基因C占优势。对引物P76／P77，总体上MM型的频率较低。 (3)P60／61位点基因型对12周龄腹脂重、腹脂率、初生重、胸肌率有影响(Po．05)： AA型腹脂重显著高于BB型(Po．05)；AA和AB型腹脂率显著高于BB型(P0．05)； AA型的初生重显著高于BB型(Po．05)；AA型胸肌率显著高于AB型(Po．05)。P93／94 位点与胸肌重有显著相关(P0．05)：EF型比EE型具有更高的胸肌重。P80／P81位点与 胸肌重(P0．05)和胸肌率(Po．oD相关：CC型与DD型之间的胸肌重差异显著(P0．05)， CC型的胸肌重较高；CC型与DD型之间的胸肌率差异极显著(Po．oD。CC型和CD 型之间差异显著(P0．05)，CC型比CD和DD型的胸肌率高，而CD型的胸肌率也比 DD型的高(P0．05)。 (4)克隆和测序鸭、鹅、鹌鹑、家鸽Myostatin编码区，比较了四个禽种问以及四个禽 种与其他物种Myostatin核苷酸序列的同源性。总体上禽类之间的Myostatin基因同源性 较高，在92％以上：禽类与哺乳类的Myostatin基因同源性在80％以上：而禽类和鱼类 的Myostatin基因同源性为60％以上。氨基酸序列比较发现禽类之间的Myostatin氨基酸 序列同源性在96％以上，禽类与哺乳动物问Myostatin氨基酸序列同源性为88—92％。说 日』l Myostatin基因在禽类和哺乳动物间是十分保守的。从进化角度分析各个物种 E!===EE==}_自!_=!=t!|=自Myostatin基因的关系，结果显示鸡、火鸡、鹌鹁的关系最近，鸭、鹅、鸽的关系较近， E!===EE==}_自!_=!=t!|=自 Myostatin基因的关系，结果显示鸡、火鸡、鹌鹁的关系最近，鸭、鹅、鸽的关系较近， 然后11；j为一类；人和狒狒、猕猴的关系最接近，小鼠和大鼠关系很近，最后和猪、马、 牛合淖为一类；鱼类有两种Myostatin，而且两种异构体之问的同源性比较高，进化树间 有的：砖系较远有的较近，而且有几个分支。 (5)克隆并测序了鸭、鹅、鹌鹑3种禽类Myostatin基因5’-调控区，结果表明这三个 扩增片段分别为1323bp，1328bp和1391bp。与鸡的相同区段的同源性