几种益生元制剂对肠道菌群作用效果的研究-病原生物学专业论文.docxVIP

独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究 工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致 谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果， 也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使 用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己 在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：团委!兰 签字日期：鳗2年旦月型日 学位论文版权使用授权书本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保 留、使用学位论文的规定，同意大连医科大学保留并向国家有关 部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和 借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内 容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制 手段保存、汇编学位论文。 论文作者签名： 指导教师签名： 签字日期： 斗年卑月．号日 几种益生元制剂对肠道菌群作用效果的研究硕士研究生：周景欣 几种益生元制剂对肠道菌群作用效果的研究 硕士研究生：周景欣 指导教师：袁杰利 副教授 专业名称：病原生物学 摘 要 目的：人体肠道内存在数量庞大、结构复杂的正常菌群。正常情况 下，肠道菌群、宿主和外部环境建立起一个动态的生态平衡，对人体的 健康起着重要作用。但在某些情况下，这种平衡可被打破，形成肠道菌 群失调，引发疾病。目前认为双歧杆菌、乳杆菌是人体肠道的主要益生 菌。双歧杆菌、乳杆菌在肠道内对维持肠道正常菌群的生态平衡、抑制 有害菌的繁殖、防止多种疾病和不良反应的发生，进而对人体发挥着重 要的生理作用。临床上肠道菌群失调患者常有双歧杆菌数量减少及伴有 其他肠道菌群减少或增多。因此增殖患者体内益生菌数量可以改善患者 肠道微生态状态，对指导临床应有重要意义。目前，对肠道菌群的调整 手段主要有两种：活菌补菌(即益生菌补菌)，和自身肠道菌增殖(即益 生元补菌)。活菌补菌以目前水平还存在着诸多不足，如定植力、活菌 存活率、胃酸关等都是尚待解决的问题。而益生元作为双歧杆菌的促进 物质，却可以克服以上缺点。本文采用体内及体外试验，并选用B／E值(即 肠道内双歧杆菌和肠杆菌数量对数值的比值)作为指标，对市场上几种 常见的低聚糖(低聚果糖、水苏糖、低聚木糖、低聚异麦芽糖)，’进行试 验比较，比较其经肠道细菌发酵后的产酸能力、对益生菌的增殖效果、 B／E值。为广大消费者及临床提供使用参考。 方法： 1．体外试验方法：在不含葡萄糖的GAM培养液中，按1％含量分别 加入低聚果糖粉，低聚水苏糖粉、低聚异麦芽糖粉和低聚木糖粉。以不 含葡萄糖的GAM培养液和含葡萄糖的GAM培养液为对照，分别在各培养 液中加入含有肠道正常菌群正常、人大便悬液，37C发酵，检测发酵6d时、 l 2小时和24小时后发酵液pH值；6小时、12ds时和24小时后发酵液中双 歧杆菌、乳杆菌、肠杆菌、肠球菌的数量。 2．体内试验采用自身对照。试验对象分别服用几种益生元制剂。 2．体内试验采用自身对照。试验对象分别服用几种益生元制剂。 在试食受试物前和连续服用受试物14天后，于第1 5天，分别无菌采集 受试者粪便109，进行10倍系列稀释，选择合适的稀释度，分别接种在 各培养基上，按要求进行肠道菌群的培养，然后对培养物进行菌落计数。 3．结果判定： ①菌落计数：计算同一稀释度的平均菌落数，如果出现2种以上的 细菌，应分别进行计数； ②需氧菌的鉴定：在需氧菌选择性培养基进行培养，通过涂片革兰 染色，确定其形态和染色性，再按常规方法进行鉴定； ③厌氧菌的鉴定：在厌氧菌选择性培养基进行培养，通过涂片染色 大致确定革兰阳性或阴性杆菌。 结果： l、体外试验：发酵64,时、12d,时、24d,时肠道菌群数量测定：各 实验组肠道菌群与对照组相比较双歧杆菌、乳杆菌、肠杆菌、肠球菌均 增多，pH值降低。各试验组间差异无显著性(P0．05)。 2、体内试验：低聚糖服用前后，人体肠道菌群数量的测定情况：体 内乳杆菌差异有显著性(PO．05)，双歧杆菌差异有高度显著性(PO．01)， 而肠杆菌、肠球菌、差异均无显著性(PO．05)。各试验组间比较差异无显 著性fP0．05)。 3、人体试服低聚糖前后，其B／E值在进行配对比较时差异具有显 著性(PO．05)，B／E值增大。各试验组间比较差异无显著性(P0．05)。 结论： l、低聚果糖、水苏糖、低聚木糖、低聚异麦芽糖均能促进双歧杆菌 和乳杆菌的增殖，并能够酸化肠道的pH值。 2、服用几种益生元制剂能够显著提高肠道的B／E值，增加肠道中有 益菌的比例，有益于稳定肠道的微生态平衡。 关键词：肠道菌