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专题3;一、课题目标
说明植物组织培养的基本原理,学习植物组织培养的基本技术,进行菊花或其他植物的组织培养。
二、课题重点与难点
课题重点:植物组织培养过程中使用的无菌技术。
课题难点:植物组织培养过程中使用的无菌技术。
教法:谈话法、多媒体辅助教学
课时安排:2课时
教学时间:3月1—2日;课题1 菊花的组织培养;什么是细胞分化?细胞分化的原因和结果?
愈伤组织是怎样形成的?有什么特点?
组织培养的过程?以及组织培养的理论基础?
脱分化、再分化?
影响组织培养的因素?
菊花组织培养的过程,及注意的问题?;一、基础知识;③特点:;⑤原因:;高度特化的动物细胞,从整个细胞来说,全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性,这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质;(3)植物组织培养;脱分化:;人参的愈伤组织;菠萝的愈伤组织;④基本过程:;二、影响植物组织培养的因素;(2)不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊,需配置适宜的培养基; 大量元素和微量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;蔗糖提供碳源,维持细胞渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。;③、高等植物是光能自养型生物,为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基?;①常用的植物激素:生长素、细胞分裂素和赤霉素; 植物激素:植物激素中( )和( )是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。植物激素的( )、( )以及( )等,都会影响实验结果 ;②按照不同的顺序使用这两类激素,会得到不同的实验结果。;思考:以下培养基出现的现象反应了什么问题?;③当同时使用这两类激素时,两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。;
(4)环境因素: ( )等条件也能影响植物组织培养。菊花组织培养,一般PH控制在( ) ;温度控制在( )℃ ;每天用日光灯照射( )小时。 ;影响植物组织培养的因素:;三、植物组织培养过程:; 胚状体:具有胚根和胚芽的结???
胚状体包裹着人工胚乳和人工种皮可以制成人工种子。;1、培育无病毒植株; 同常规的无性繁殖方法相比,组织培养快速繁殖法主要具有以下优点:
(1)快速。
采用常规的方法如分株法,一棵花卉一年一般只能生产几株或几十株,但用组织培养的方法则每年可以繁殖出几万甚至数百万的小植株。
(2)周年生产。花卉组织培养快速繁殖是在实验室中进行,因条件可控,所以不受季节限制,可以全年进行连续生产。而常规的无性繁殖则受季节限制,只能在花卉生长季节进行繁殖。
(3)经济效益高。花卉组织培养快速繁殖所需要的空间小,在一个200平方米的培养室内一年可生产试管苗上百万株。如按每株1元计算,每年产值上百万元。
(4)以组织培养繁殖的种苗与母株有着相同的遗传基因。所以使用这项技术可让优良的品种不断地延续。;制备MS固体培养基;五、实验操作;MS固体培养基成分及比例;①无机物中大量元素浓缩10倍,微量元素浓缩100倍,常温保存;2、配置培养基;3、灭菌;② 酒精处理;(三)接种;4、接种注意事项;思考:你打算做几组重复?你打算设置对照实验吗?;(四)培养; 继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同,在严格的无菌条件下,将愈伤组织连同原来的外植体一起移到新培养基上。愈伤组织的继代培养一代为20d。如果延长时间,培养基中营养物质减少,外植体会分泌有毒物质,造成自身中毒。如果愈伤组织长到直径为1-1.5cm时,就可以进行试管苗培养,否则还需进行第二代继代培养.;3、试管苗的培养;固体基质型,含水量高、
蓄水性强、透性好,适合栽培;(六)栽培;1、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌)
2、外植体的消毒(酒精、氯化汞)
3、接种的无菌操作(酒精、酒精灯——灼烧)
4、无菌箱中的培养;
5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。;1、外植体带菌;污染的预防措施;结果分析与评价;本课题内容小结;作业:P36
1、在植物组织培养过程中,为什么要进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作。
2、在选取菊花茎段是,为什么要选取生长旺盛的嫩枝?;练习1、下图是植物组织培养的简略表示。据此回答:
(1)①表示__________________,它能被培养成为④的根本原因是______________________________________。
(2)②表示____________,它与①相比分化程度__________,全能性____________.
(3)若想制成人工种子,应选用____________。
(4)若①是花药,则④是__________
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