生物选修专题三.ppt

指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或原生质体），在人工控制的培养基及环境条件（温度及光照）下，得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。 植物组织培养原理： 概念：细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。 原因：是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质 什么叫分化？其实质是什么? 什么叫脱（去）分化、再分化？ 愈伤组织的细胞有什么特点？ 二、植物组织培养的基本过程 三、影响植物组织培养的因素： 3、不同植物激素使用顺序 4、不同植物激素使用量 课题2 月季的花药培养 主要知识： （一）、被子植物的花粉发育和产生花粉植株的两条途径 （二）、月季花药离体培养的操作过程 （三）、影响花药培养的因素 三、接种和培养 剥取花药 * 课题1 菊花的组织培养 课题2 月季的花药培养 学习目标： 1、掌握植物组织培养的原理 2、学会菊花或其他植物的组织培养 重 难 点： 植物组织培养过程中使用的 无菌技术 又称：植物离体培养 一、植物组织培养的概念 植物细胞的全能性 阅读资料解决下列问题： 二、植物组织培养的基本过程 我就是 愈伤组织哦！ 1、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 2、培养基的配制(MS培养基) 大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等 未开花植物的茎上部新萌生的侧枝 分化频率提高 同时使用 细胞既分裂也分化 先细胞分裂素， 后生长素 有利于细胞分裂但不分化 先生长素， 后细胞分裂素 实验结果 使用顺序 促进愈伤组织生长 比值适中 促芽分化， 抑根形成 比值低时 促根分化， 抑芽形成 比值高时 结果 生长素/细胞分裂素比值 5、pH、温度、光照（菊花组培） pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h 6、消毒 在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境 植物组织培养过程: 离体组织或细胞 植物体 脱分化 细胞分裂素≈生长素 愈伤组织 芽 根 细胞分裂素生长素 细胞分裂素生长素 再分化 不需要光 需要光 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培 养 栽 培 四、实验操作 移 栽 冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上 配制各种母液 配制培养基 灭菌 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ 菊花的组织培养 再分化 材料性质、营养物质、 调节物质、环境条件 外植体的消毒 接种 基本原理: 细胞的全能性 基本过程: 脱分化 愈伤组织 影响因素： 操作流程： 配制MS固体培养基 培养 移栽 栽培 植物的花药培养在育种上有什么意义？ 花粉粒（1N） 单倍体植株（1N） 二倍体纯合子植株（2N） 缩短了育种周期，为新品种的培育开辟了新途径。 花的结构 花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉 花粉是由花粉母细胞（即小孢子母细胞）经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。 花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期等阶段。 （一）被子植物的花粉发育 雄蕊 （一）被子植物的花粉发育 1花粉母细胞（2n） 4个小孢子(小孢子 四分体)（n） 减数分裂 有丝分裂 1个花粉管细胞核（n） 1个生殖细胞核（n） 有丝分裂 2个精子 单核居中期（n） 单核靠边期（n） （二）产生花粉植株的两种途径 形成原因：主要取决于培养基中的激素的种类及其浓度的配比 （三）影响花药培养的因素 1、材料的选择 不同植物 同一植物的不同生理状况（花期早期－初花期、花蕾） 合适的花粉发育期（单核居中期与靠边期之间） 此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等 2、培养基的组成 实验操作 材料选取 材料和 消毒 接种和 培养 材料的选择 选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 最常用的方法有醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 材料的消毒： 花蕾 （70％酒精） 大约30s