分子药理学.pptVIP

综述范围 细胞信号转导与疾病 细胞凋亡与疾病 氧化应激与疾病 蛋白质组学研究进展 细胞自噬的作用及与细胞凋亡之间的联系 细胞重编程的研究状况及其医学意义 表观遗传学对医药发展的影响 * （一）G蛋白的活化启动信号转导 信号转导途径的基本模式 ： 配体+受体 ＋ G蛋白 效应分子 第二信使 靶分子 生物学效应 * G蛋白循环 G蛋白自身的活化和非活化作为一种分子开关，将膜外的信号转换为膜内的信号并进一步放大信号 G蛋白循环 * 第二信使 G-蛋白, cAMP, cGMP, 肌醇磷脂 Ca 2+ * 与配体结合后具有酪氨酸蛋白激酶活性，如胰岛素受体、表皮生长因子受体、血小板生长因子受体等。 （三）酪氨酸蛋白激酶受体 * 在结构上分为三个区域： 位于质膜外的配体结合域：肽链的N端 跨膜区：与G蛋白偶联受体和通道性受体多次跨膜不同，每条肽链只跨膜一次 处于胞浆侧的催化域，具有酶的活性，并具有自磷酸化位点 * 作用模式： 配体（如表皮生长因子、胰岛素）与受体结合，引起受体二聚化 二聚体的酪氨酸蛋白激酶被激活，彼此使对方的某些酪氨酸残基磷酸化，这一过程称为自身磷酸化。 利用酪氨酸蛋白激酶活性进而影响细胞内信息传递体系，产生生物效应 效应时程一般为数小时 * 胰岛素的作用机制 胰岛素与特异性受体结合，引起一系列的信号转导，最终引起葡萄糖转运蛋白(GLUT4)激活，将葡萄糖携带入细胞内 * （四）核受体 位于细胞内的受体多为转录因子，与相应配体结合后，能与DNA的顺式作用元件结合，调节基因转录。 包括糖皮质激素受体、雌激素受体、雄激素受体、甲状腺素受体、维生素D受体等。 * 高度可变区 位于N端，为转录激活结构域 DNA结合区 位于中部，含有锌指结构 激素结合区 位于C端，结合配体或热休克蛋白，含有核定位信号，使受体二聚化，激活转录 铰链区 含有核定位信号 * 作用模式： 在细胞内，受体与抑制性蛋白（如Hsp90）结合形成复合物，处于非活化状态 配体（如皮质醇等甾体激素）与受体结合，导致抑制性蛋白从复合物上解离下来，从而使受体暴露出DNA结合位点而被激活 与靶基因结合，调节其转录、表达，从而影响靶细胞的代谢 效应时程为数小时甚至数天 * 核受体 * 胞内受体调节生理过程 * * * * 分子药理学molecular pharmacology 周四桂 广东药学院 药理系 * 药物效应动力学 （Pharmacodynamics） 药物代谢动力学（Pharmacokinetics） 作用、作用机制 吸收、分布、代谢、排泄 * 生命科学的发展由宏观到微观，药理学的研究也由整体水平、器官水平、组织水平、细胞及亚细胞水平深入到基因及其表达产物的分子水平。 * 作为药理学研究对象的药理作用，本来就是药物小分子和生物大分子之间的相互作用。 分子药理学属于药理学的一个重要分支，是药理学发展的一门前沿学科。是以分子为基本功能单位，用分子生物学的理论和技术，从分子水平和基因表达的角度，去研究、分析和阐明药物与机体间相互作用的原理。 * 分子生物学方法：研究基础 蛋白质印迹(western blot)、PCR、real-time PCR、RNA干扰、重组质粒构建、转基因动物、基因敲除动物等 放射配体-受体结合测定法 用放射性核素(3H、125I)标记配体与含有受体的组织、细胞、细胞膜、细胞质或纯化的蛋白，在适宜的条件下孵育，使之形成复合体，测定复合体的放射性，通过作图、计算求得参数，从其参数判断受体的选择性和分型。 分子药理学的研究技术与方法 * 电生理学方法：膜片钳技术 通过测定细胞膜上众多离子流中单一跨膜离子流，从电压与电流之比求出膜电导变化，分析离子通道开关的动态变化。 免疫学检测方法：免疫组织化学、酶联免疫吸附法 生物活性物质的定性和定量检测：荧光分光光度法、气相色谱、高压液相色谱等 * 受体：受体的三级结构、受体及其亚型的克隆及结构研究、受体与配体结合位点的三维构象及结合机制研究、高选择性受体及其亚型的配体研究等。 细胞内信号转导： 对发病机制的深入认识 为新的诊断和治疗提供靶点 新药筛选靶点：应用计算机技术与机器人技术，建立了药物高通量筛选系统，研制高效新药。 分子药理学的前景展望 * 构效关系与新药分子设计：依据分子结构-药理作用关系，结合计算机图像从屏幕上直观、立体地观看构型变化，指导药物分子结构的改造，优选出低毒、高效的配体分子，有针对性地设计合成新药。 生物制药：利用基因工程用细菌制造药物。如重组链激酶、人胰岛素、人生长素、白细胞介素等 分子药理学的前景展望 * 基因治疗:利用重组DNA技术在体外组装好一段正常的基因，采用导入技术将该片段导入宿主细胞内进行表达，从而将不正常的基因予以纠