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微藻保藏方法的建立 Ⅰ、固体平板低温保种 保种时间为2年; Ⅱ、液体低温保种 保种时间为1年; Ⅲ、液体常温保种 保种时间为3个月。 建立了3种保种方法 2. 建立面向微藻生物柴油生产藻种综合品质评价方法(整合了17种指标) 藻种品质评价指标非常复杂 “借助数学的眼睛认识微藻” 模糊综合评价方法 三株微藻的微藻模糊综合评价结果表 在美国的能源部2010年提出的 “Algae-to-Biofuel Production Pathways”基础上,制定了产生物柴油微藻藻种评价指标并根据微藻生物柴油开发的各个环节的要求,将评价指标分为三组:产生物柴油微藻的生理、生化指标;产生物柴油微藻的培养工艺指标;产生物柴油微藻的后处理指标。 化学条件优化 CO2和KNO3的三维空间响应曲面图 CO2和KNO3的二维等高线图 优化前藻光密度(生物量)为0.238,优化后藻光密度(生物量)为2.139,生物量提高近10倍。 物理条件优化 温度和光照的三维空间响应曲面图 温度和光照的二维等高线图 优化前培养周期25天,优化后培养周期缩短为10天,培养周期缩短60%。 废水资源化利用 COD降80%以上 生物量增加近20倍 培养前 培养后 培养后 Effects of different ventilation rates on Chlorella vulgar biomass Effects of different ventilation rates on Chlorella vulgar lipid content 外置光源鼓泡式式光生物反应器 气升内导管式光生物反应 内置光源鼓泡式光生物反应 增加光合作用效率的方法: 截短光合系统的天线叶绿素等可以使光合效率提高3倍 适合的培养环境(例如管式反应器中氧胁迫的解除) 增加混合、合理的光暗循环(气体流速、气体分布器的结构与布置调整) 反应器的结构改造、反应器的放置角度调整 新型微藻生态光源 光生物反应器实现 5、新型高效光合反应器的设计开发 气体分布器的改良和通气条件的优化 对于微藻规模化制备,从藻液中采收微藻一直是个瓶颈 本课题组,对金属盐、高分子聚合物、电场和超声絮凝进行了系统的研究 金属盐采收效果图 聚丙烯酰胺、壳聚糖 6、藻体收集技术 试验号 超声功率(W) 间隔 时间 (s) 超声时间(min) 温度(℃) 细胞 破碎率 (%) 油脂含量 (%) 1 1(200) 1(5) 1(10) 1(30) 38±4 C 9.12±0.97 C 2 1 2(10) 2(20) 2(50) 53±4 BC 12.87±0.84 ABC 3 1 3(15) 3(30) 3(70) 65±7 AB 16.22±1.62 AB 4 2(400) 1 2 3 48±4 BC 11.65±0.54 BC 5 2 2 3 1 68±4 AB 16.51±1.31 AB 6 2 3 1 2 35±7 C 8.19±1.12 C 7 3(600) 1 3 2 80±0 A 19.66±0.17 A 8 3 2 1 3 43±4 BC 10.67±1.12 BC 9 3 3 2 1 45±7 BC 10.96±2.17 BC 1、液氮破碎效果最好,细胞破碎率达100%;破碎时间短,操作简单,是可以工业化的一种方法。 2、酶破碎效果较好,细胞破碎率达90%以上;操作简单,是一种潜在工业化方法。 7、不同细胞破碎方法的比较 核酮糖-1,5-二磷酸 CO2+H2O 3-磷酸甘油酸 1,3-二磷酸甘油酸 甘油醛-3-磷酸 关键因子 温度 光照 pH CO2 关键酶 核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶 优化 优化 活化 增强光合作用,提高生物量 光合作用关键因子优化及关键酶活化后,生物量提高了30% 8、关键酶的代谢调控 二羟丙酮磷酸 1,3-二磷酸甘油酸 3-磷酸甘油酸 2-磷酸甘油酸 磷酸烯醇式丙酮酸 烯醇式丙酮酸 丙酮酸 乙酰-CoA 丙二酸单酰-CoA 乙酰-CoA 乙酰-ACP 丙二酸单酰ACP 乙酰合酶 乙酰乙酰-ACP D-β-羟丁酰-ACP α,β-反式-羟丁酰-ACP 丁酰-ACP … 软脂酰-ACP 软脂酸 乳酸 乙醇 丙酮酸激酶 脂肪酸合酶 调控代谢网络,提高油脂含量 抑制代谢旁路 代谢调控后油脂含量提高了近20% 激活 激活 乙酰-CoA羧化酶 8、关键酶的代谢调控 碳链长 比例(%) 16:2 17.81 16:0 40.73 20:0 30.36 22:1 5.47 24:2 5.63 9、小球藻油脂的GC-MS检测 小球藻含16-20碳链长的脂肪酸占总脂肪酸的88.9%,是生物柴油的良好原料。 紫金山 固定CO2:480万吨/年 释放氧气:380万吨/年 产生物质:327万吨/
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