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4.科技进步奖公示: 多维蛋白组学定量分析技术的建立及其在原发性肝癌中的应用 项目名称 多维蛋白组学定量分析技术的建立及其在原发性肝癌中的应用 推荐单位 （推荐专家） 大连市科技局 项目简介 本项目所属领域为普通外科学、实验肿瘤学和肿瘤诊断学。通过国内外多院校协作创新，共同建立了高通量、多维蛋白质组学技术平台，利用此平台针对原发性肝癌瓶颈问题——早期诊断、预后评估、生物标记物及靶向药物位点筛选、临床检测等方面，对进一步揭示肝癌发生发展、转移、耐药等机制进行了深入研究，提高我国乃至全球范围原发性肝癌的诊疗水平具有重要意义。 成功建立了高通量多维蛋白质组学（全蛋白、磷酸化蛋白、糖蛋白、膜蛋白）定量分析技术平台，在此平台基础上开展原发性肝癌的相关研究，取得如下科技创新成果：（1）发展了Ti4+-IMAC磷酸化肽段富集技术，应用了新的自动化磷酸化肽段鉴定验证软件（APIVASE）可以显著提高磷酸化肽段和位点鉴定的灵敏度，提高了磷酸化蛋白质的鉴定数量，基于此技术，对比鉴定出其149个人肝癌相关磷酸化位点，并探讨了p-PED/PEA-15、p-Pinin等对肝癌转移复发的临床检查应用价值；（2）构建的微流控仿生肝芯片模拟体内微环境，针对蛋白质组学定量分析技术筛选出的肝癌特异性的磷酸化修饰蛋白（p-PED/PEA-15、p-P27等），并对其功能及作用机制进行分析，并以此为平台进一步探讨了特异性的磷酸化修饰蛋白在肝癌复发转移中的重要作用；（3）发展了离子液体助溶联合功能化磁性微球富集纯化细胞膜蛋白技术，对比分析肝癌耐药细胞株差异表达的膜蛋白，筛选出了多个可能与肝癌耐药有关的新型膜蛋白（NgBR、δ opioid receptors等），探索了NgBR对肝癌化疗敏感性的调控作用及机制；（4）发展了一种在酰肼微球上捕集和二甲基标记糖基化肽段的一体化定量分析方法，提高了糖基化肽段的富集回收率和检测灵敏度；发展了一种同时分析来源于糖基化蛋白的糖基化肽段和非糖基化肽段的细胞表面捕集技术，特异性鉴定细胞表面糖基化蛋白质；利用糖基化蛋白质富集、分析、检测新技术，鉴定到肝癌耐药相关糖基化蛋白P-gp，并针对肝癌化疗不敏感，发现二甲双胍对多药耐药蛋白P-gp的抑制作用及分子机制，提出了：“联合二甲双胍对肝癌患者TACE的辅助治疗”及“应用二甲双胍增强索拉菲尼药物敏感性的治疗”策略，为二甲双胍作为临床抗肿瘤药物或者辅助用药奠定理论基础；（5）构建了以多维蛋白质组学定量分析等多项技术为基础的原发性肝癌个体化综合治疗平台，在优化提高每种单一肝癌治疗技术的同时，更注重循证医学理念，搭建以外科手术治疗为主导，辅以肝移植、介入、放射性粒子、射频、分子靶向、中药（槐耳颗粒）等多模式的肝癌个体化综合治疗平台， MDT肝癌综合诊疗率达80%以上，为肝癌患者提供一站式的诊断和治疗，使每一位患者都能得到最合理最有效的个体化治疗，实现患者利益的最大化。 本成果形成了肝癌综合诊疗的新模式，先后用于肝癌患者诊治280余人次，显著提高肝癌生存期与生存质量，研究成果已发表SCI文章23余篇（累计IF：79.554），培养博士研究生14名，硕士研究生25名，主持和参与国家级课题（国家863计划、国家自然科学基金面上项目）、省级及市级课题多项，总经费300余万元。获得国家专利技术授权1项，授理1项。 完成单位 及创新推广贡献 大连医科大学附属第二医院、中科院大连化学物理研究所、大连医科大学附属第一医院。各完成单位分工明确、合作创新，为项目的多维蛋白组学定量分析技术的建立、基础实验开展、基于多维蛋白质组学大数据下的MDT原发性肝癌诊疗等工作做出了贡献。 推广应用情况 本项目于大连医科大学附属第二医院、大连医科大学附属第一医院、大连大学附属中山医院、大连市中心医院、友谊医院及广西医科大学附属第一医院等多家医院应用，取得了良好的效果和社会效益。 曾获科技奖励情况 大连市科技进步一等奖、辽宁省科技进步二等奖 主要知识产权目录（不超过10件） 序号 知识产权类别 知识产权具体名称 国家 （地区） 授权号 授权日期 证书编号 权利人 发明人 1 授权专利 一种酶催化的N端标记的定量蛋白质组学方法 中国 201310245375X 2016.05.04 2053665 中国科学院大连化学物理研究所 邹汉法，潘彦博，叶明亮 2 受理专利 一种磷酸化蛋白质组样品快速处理方法 中国 邹汉法，刘芳洁，叶明亮 论文、论著目录（不超过10篇） 序号 论文专著名称/刊名/作者 影响因子 年卷页码 发表时间年月日 通讯作者 第一作者 国内作者 SCI他引次数 他引总次数 知识产权是否国内所有 1 Metformin mediates resensitivity to 5-fluorouracil in hepatocel