单克隆抗体的应用.docVIP

11307100408 徐颜玉 MED119009.01 免疫学的诺贝尔辉煌 单克隆抗体的应用 徐颜玉 摘 要：单克隆抗体自1975年出现以来，因其特异性强、灵敏度高、可大量获取等特点，迅速被作为生物探针广泛地应用于多个领域。近年来，基因工程抗体的出现又将进一步解决传统抗体存在的制备周期长、成本较高和鼠源性等问题，再一次彰显了单克隆抗体技术的美好前景。本文主要对单克隆抗体的基本情况及其近年来的应用作一综述。 关键词:单克隆抗体 应用 1984年诺贝尔医学或生物学奖授予了单克隆抗体制备的首创者Kohler和Milstein。他们于1975年利用动物细胞融合技术获得了第一株既能分泌抗羊红血球单克隆抗体、又能无限增殖的杂交瘤细胞。从此采用杂交瘤细胞技术制备针对特定抗原的单克隆抗体的技术开始广泛地渗透到分子科学、生物学、免疫学、药理学、食品工业、农业和兽医学等各个领域。近年来，随着分子生物学技术的发展，又出现了嵌合式单克隆抗体和由转基因小鼠、噬菌体展示技术、核糖体展示技术及共价展示技术所制备的单克隆抗体，这些新技术的出现将有效地解决传统单克隆抗体的鼠源性问题，进一步促进了该技术在临床医学方面的应用。 单克隆抗体基本情况 1.1单克隆抗体的定义 单克隆抗体（monoclonal antibody,McAb）是指由一个B细胞分化增殖形成的浆细胞所产生的针对单一抗原决定簇的抗体。单克隆抗体与常规免疫血清(即多克隆抗体）的主要区别在于单克隆抗体为单一种B细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子。参考 参考文献： 1葛红霞，单克隆抗体技术及其应用.畜牧兽医科技信息，2007（3） 1.2单克隆抗体的优越性 与多克隆抗体相比，单克隆抗体具有特异性高、纯度高、均质性好、亲和力不变、重复性好、效价高、成本低、不易发生交叉反应，而且生产方便、易于精制浓缩等特点。2 金涌，单克隆抗体技术及其在食品卫生检验中的应用.农牧产品开发，2001(5) 2 金涌，单克隆抗体技术及其在食品卫生检验中的应用.农牧产品开发，2001(5) 1.3单克隆抗体制备的基本原理 要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B细胞，但是分化后的B细胞都不再具备增殖能力，在体外培养最多存活10-20天3何忠效，浅谈单克隆抗体.生物学通报，2004,39（9），不具备大规模培养的优势；而实验证明肿瘤细胞在体外条件下可以无限传代。所以，为了制备大量纯一的单克隆抗体，可以用PEG（聚二乙醇）等融合剂将骨髓瘤细胞和经某种抗原诱导产生的特异性B细胞在体外进行细胞融合（亦可用电融合或激光融合），经过几次筛选后，产生能连续传代、稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,该杂交瘤细胞所产生的抗体即我们所称的单克隆抗体。例： 3何忠效，浅谈单克隆抗体.生物学通报，2004,39（9） 兔单克隆抗体的制备流程示意图: 单克隆抗体的应用 2.1单克隆抗体在免疫学上的应用 单克隆抗体由于其与抗原结合的特异性及检验过程中逐级放大的特点，可用于分析抗原的细微结构及检验抗原抗体未知的结构关系，对分析体内免疫反应机制、判断机体免疫水平和免疫调节平衡状态具有重要的实际意义；生产出针对复杂生物混合物中的特定分子的抗体，可用于分离、分析及纯化该特定分子抗原；其试剂可用于临床诊断和治疗，或用于以单抗为弹头的“生物导弹”药物等.4朱学泰，谢溱，马瑞君，单克隆抗体制备技术研究进展.甘肃科技，2005,21（3） 4朱学泰，谢溱，马瑞君，单克隆抗体制备技术研究进展.甘肃科技，2005,21（3） 2.2单克隆抗体在分子科学上的应用 单克隆抗体可用于蛋白质的提纯，它是亲和层析中重要的配体。将单抗吸附在一个惰性的固相基质上，并制备成层析柱，当样品流经层析柱时，待分离的的抗原可与相固的单克隆抗体发生特异性结合，其余成分不能与之结合。将层析液充分洗脱后，改变洗脱液的离子强度或pH,欲分离的抗原与抗体解离，收集洗脱液便可得到欲纯化的抗原。具体的实例有:1985年，Disco等用此法制成了单克隆抗体亲和层析柱，用于提纯大豆花叶病毒并获得成功。5许保疆，游一，郭成留，单克隆抗体在农业和医学上的应用.中国畜牧兽医，2010,37（7） 5许保疆，游一，郭成留，单克隆抗体在农业和医学上的应用.中国畜牧兽医，2010,37（7） 2.3单克隆抗体在食品工业上的应用 单克隆抗体因其高特异性现已在食品加工生产以及科学研究中得到广泛应用。有关方面包括食品的成分，食品的生产和加工，食品安全性以及食品成分在加工前后的分子水平上变化及其加工特性。 2.3.1单克隆抗体在乳品工业中的应用 单克隆抗体在乳品工业中主要用于牛奶成分分析；形成牛奶正