家族性糖尿病人群中线粒体基因突变筛查及家系分析研究-内科学(内分泌代谢)专业论文.docxVIP

我们应用PCR-RFLP技术结合直接测序方法对随机抽取的无亲缘 我们应用PCR-RFLP技术结合直接测序方法对随机抽取的无亲缘 关系的770个糖尿病家系的先证者及309例非糖尿病对照者进行线粒 体基因tRNA“(3243，3256)，tRNAs”(12258)，tRNA6h(14709)， tRNA‘,(8296，8344，8363)，ND—l(3316，3394，3426)，ND_4(12026) 区11个已知位点突变或变异的筛查。结果见到，在糖尿病先证者组 中发现13例tRNA“3243 A—G突变(13／770，1．69％)，9例tRNAc“14709 T—C变异(9／770，1．17％)，17例ND-13316 G—A变异(17／770，2．21 ％)，18例NO-13394 T—C变异(18／770，2．34％)，28例ND一412026 A—G变异(28／770，3．64％)；在正常对照组中发现5例14709 T—C变 异(5／309，1．62％)，5例3316 G—A变异(5／309，1．62％)和6例 3394 T—C变异(6／309，1．94％)变异，9例12026 A—G变异 (9／309，2．9l％)，未见到3243 A—G，12258C--A突变和NO一1区新 的突变携带者。在两组中均未见到tRNA“3256C--T，tRNAm8296A-- G，tRNAh88344A--G，tRNAL,。8363G-·A，tRNA“12258C--A和NO-13426 A—G突变。在糖尿病先证者组中尚见到同时伴有两个位点改变的情 况，其中3243 A—G突变和3394 T—C变异者2例，3243 A—G突变 和12026 A—G变异2例。分别比较14709，3316，3394，12026位点 变异在糖尿病先证者组和对照组的发生率，未见到统计学差异。由此 提示，在所研究的11个位点中，线粒体基因tRNA“3243 A—G突变 是中国人群线粒体糖尿病的致病基因，14709，3316，3394，12026 位点变异仅是中国人线粒体基因多态，中国人群中未见到tRNA 3256C-，T，tRNAL758296A—G，tRNAl‘,。8344A--G，tRNA伽8363G-·A，tRNA“ 12258C-·A和ND-13426 12258C-·A和ND-13426 A—G突变，它们可能不是中国人线粒体糖尿 病的致病基因。 为了明确线粒体糖尿病的遗传规律及f艋床特点，我们对在第一部 分研究中检测出来的13例线粒体DNAnt3243A-+G突变携带者以及4 例双重突变携带者(3243 A—G突变和3394 T—C变异者2例，3243 A—G突变和12026 A—G变异2例)的家系成员进行基因筛查家系分 析研究。在研究中未见到家系一级亲亲属以及其他成员携带复合突变 的情况，提示家系先证者携带的3394 T—C或12026 A—G变异很可 能仅是微效基因，对线粒体糖尿病的发病不起决定作用，或者是与糖 尿病无关的基因。研究发现，较之2型糖尿病患者，线粒体糖尿病患 者发病年龄轻(38．424-9．21岁)，体型消瘦(19．194-2．48 kg／m2)， 空腹C肽及空腹胰岛素水平较低；线粒体糖尿病患者的总体胰岛素敏 感性(HOMA-IR指数)高于2型糖尿病患者(3．5l±2．19 VS 5．19± 2．80，P=O．02)，但从现有资料看，部分患者存在的胰岛素抵抗亦可 能与之有关。线粒体糖尿病患者胰岛素分泌水平低于2型糖尿病患 者，大多用胰岛素治疗(14／24，58．33％)。就伴随症状而言，线粒 体糖尿病患者多伴有神经性耳聋(16／24，66．67％)。线粒体糖尿病 的临床特点如下：①多数呈母系遗传，少数可为散发，在家族性糖尿 病人群中的发生率为1．69％；②多于45岁以前发病；⑨体型多偏瘦 (BMI23kg／m2),④胰岛13细胞分泌功能明显降低，部分患者同时伴 有胰岛素抵抗；⑤多数患者伴神经性耳聋。研究结果还提示应结合临 床特点，对高度可疑的线粒体糖尿病高危个体，即使线粒体 tRNA““3243 tRNA““3243 A—G突变检查阴性，也应对先证者的一级亲属进行基因 筛查。 本研究为进一步阐明线粒体糖尿病的分子病因奠定基础；为线粒 体糖尿病临床个体化治疗提供理论依据和指导。 关键词：线粒体DNA，突变，线粒体糖尿病，家系 SCREENING SCREENING MUTATIONS OF MITOCHONDRIAL DNA AND ANAI YSIS OF THE DIABETES PEDIGREES IN FAMIl JAI．DL墟ETES MELLITUS ABSTRACT It is c