以猪角膜脱细胞基质为载体培养人脐静脉内皮细胞-中国病理生理杂志.PDF

·１２８８· 中国病理生理杂志　ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＰａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　２０１３，２９（７）：１２８８１２９３ ［文章编号］　１０００４７１８（２０１３）０７１２８８０６ 以猪角膜脱细胞基质为载体培养人脐静脉内皮细胞 构建实验性角膜后板层 １ １△ ２ ３ ４ ３ 祁　冰 ，　侯光辉 ，　李　柳 ，　季青山 ，　吴　静 ，　周　清 １ ２ （暨南大学附属第三医院，珠海市人民医院眼科，广东 珠海５１９０００；南昌大学附属第三医院，南昌市第一医院眼科， ３ ４ 江西 南昌３３００３８；暨南大学附属第一医院眼科，广东 广州５１０６３０；暨南大学医学院眼科研究室，广东 广州５１０６３２） 　　［摘　要］　目的：探讨以异种后弹力膜／基质为载体诱导人脐静脉内皮细胞向角膜内皮细胞分化的可行性及 移植术后在活体的生理功能。方法：体外分离培养脐静脉内皮细胞作为诱导移植的种子细胞；取当地质检合格的 猪眼球以直径６．２ｍｍ、厚１００ ｍ、冷冻脱水进行角膜深板层载体的制备；接种经ＣＭＤｉＩ荧光标记的第２～３代人 μ 脐静脉内皮细胞于载体的后弹力层面，体外培养７～１０ｄ行细胞形态、密度、组织学和扫描电镜观察，待细胞与后弹 力层面融合形成单层后，用于兔角膜移植。受眼：正常健康新西兰大白兔２４只（２４眼），实验组（人脐静脉内皮细 胞移植组）１２眼，对照组（单纯猪角膜深板层移植组）１２眼，全角膜范围去除术眼内皮细胞，实施移植手术。结果： 人脐静脉内皮细胞在猪后弹力膜／基质载体上贴附生长，形成紧密连接的单层，形态近似六角形，呈铺路石状分布， 具有正常兔角膜内皮细胞的超微结构。术后８周实验组角膜基本透明，周边角膜略有水肿。对照组单纯猪角膜深 板层移植后，移植角膜明显水肿、混浊。结论：以异种角膜后弹力膜／基质为载体培养的人脐静脉内皮细胞，行异种 异体移植后，能够在活体上成活，并能维持角膜透明，具有正常角膜内皮细胞的生物学功能。深板层角膜内皮移植 术是体外培养血管内皮细胞移植的一种有效术式。 ［关键词］　人脐静脉内皮细胞；猪角膜脱细胞基质；角膜内皮细胞；移植 　　［中图分类号］　Ｒ３６３　　　　　［文献标志码］　Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００４７１８．２０１３．０７．０２５ Ｄｅｃｅｌｌｕｌａｒｉｚｅｄｐｏｒｃｉｎｅｃｏｒｎｅａｌｐｏｓｔｅｒｉｏｒｌａｍｅｌｌａｅａｓｃａｒｒｉｅｒｍａｔｒｉｘｆｏｒ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｎｇｈｕｍａｎｕｍｂｉｌｉｃａｌｖｅｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｉｎｖｉｔｒｏ １ １ ２ ３ ４ ３ ＱＩＢｉｎｇ，ＨＯＵＧｕａｎｇｈｕｉ，ＬＩＬｉｕ，ＪＩＱｉｎｇｓｈａｎ，ＷＵＪｉｎｇ，ＺＨＯＵＱｉｎｇ １ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ，ＰｅｏｐｌｅｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＺｈｕｈａｉＣｉｔｙ，ＴｈｅＴｈｉｒｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＪｉｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈｕｈａｉ ２ ５１９０００，Ｃｈｉｎａ；ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＮａｎｃｈａｎｇＣｉｔｙ，ＴｈｅＴｈｉｒｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＮａｎ ３ ｃｈａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ３３００３８，Ｃｈｉｎａ；ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨ