肌细胞生成素在人体失神经骨骼肌表达的实验研究-手外科专业论文.docxVIP

肌细胞生成素在人体失神经骨骼肌表达的实验研究肌细胞生成素在人体失神经骨骼肌 肌细胞生成素在人体失神经骨骼肌表达的实验研究 肌细胞生成素在人体失神经骨骼肌 表达的实验研究 摘 要 目的：从分子水平研究人体失神经骨骼肌的再生状态， 为临床上周围神经损伤后运用基因治疗方法防止骨骼肌失 神经萎缩提供理论基础。／方法：应用细胞培养技术、免疫 细胞(组织)化学技术与半定量RT-PCR技术：(1)检测 肌细胞生成素mRNA在培养人体肌卫星细胞中的表达；(2) 捡j则失神经骨骼肌内肌卫星细胞的增生状态与肌细胞生成 素ⅢRN^表达水平；(3)检测肌细胞生成素mRNA在失神经 骨骼肌整体水平的表达；(4)形态学观察骨骼肌失神经萎 缩，结果：(1)伴随肌卫星细胞分化过程，肌细胞生成素 mRNA表达增加；(2)失神经早期骨骼肌肌卫星细胞增生， 但肌细胞生成素mRNA表达低于肌卫星细胞分化培养起始 期的水平；(3)肌细胞生成素mRNA在骨骼肌失神经后1 年内一直处于高表达状态，至半年最高，后渐下降，但高 于正常水平；(4)病理分析提示失神经后p年内肌萎缩形 态学指标变化较失神经2年后程度要轻。y结论：(i)肌细 胞生成素是和肌卫星细胞分化形成肌纤维相关的调节因 子；(2)骨骼肌失神经早期发生微弱的再生反应；(3)肌 细胞生成素mRNA在失神经1年内的骨骼肌高水平表达， 反映骨骼肌“重新进入”再生状态，有利于骨骼肌接受神 经再支配；(4)虽然失神经支配后2年骨骼肌肌细胞生成 素mRNA表达高于正常水平，但形态学指标变化不利于骨 骼肌功能恢复。因此，本研究结果提示在骨骼肌失神经半 年至1年时间内进行肌细胞生成素转基因干预，可以防治 肌萎缩，继而提高晚期周围神经修复术疗效。 关键词：肌萎缩肌细胞生成素肌卫星细胞细胞培养聚 合酶链式反应 分类号：R 6 8 5．4 塑塑堕兰盛耋垄△堡叁塑丝量塑盟室竺望茎鉴竺至The 塑塑堕兰盛耋垄△堡叁塑丝量塑盟室竺望茎鉴竺至 The Experimental Study on Expression of Myogenin in Human Skeletal Muscle after Denervat ion Abs ttact Objective： In order to prevent mu s cle at rophy afte r peripherial nerve ilnjury wi th gene theraPY．the present re search detected the Proliferatioil and differelltiation state of human skeletal mu scle s after deriervation．Methods：Primary celi culture， immunocyto(hi sto)chemi stry and quantitative RT-PCR techni口ue s were used to inve Stigate：(1)the expres sion of myogenin mRNA during satellite cell s differentiation．(2) the proliferat ion of satell ite cell s in denervated skeleta l musc le s and myogellil3．mRNA 1evel in them，(3)the myogenin mRNA level in musc【e ti ssues with different denervatiOil periods、(4) the mo rpho Logical change s of skeletal muscles after nerve injury．Result：(1)MyogeMn mRNA expres sion increa sed along with differentiation Proces s of satellite cell s．(2)Mus cle satellite cell s pr01iferated after peripheral nerye illjury， but the myogenil3．mRNA 1evel of them wa s 10wer than that of satellite cell s at 0一tlme differentiation cultivation．(3)High le