液基细胞涂片染色试剂盒说明书.doc

液基细胞涂片染色试剂盒说明书 【产品名称】 通用名称：液基细胞涂片染色试剂盒 【包装规格】 100人份/箱、200人份/箱 【贮存条件及有效期】 贮存于常温，有效期24个月。 【预期用途】 液基细胞技术是近年来迅速发展起来的薄层细胞制片技术，能够替代传统巴氏涂片。与之相比，可以大大提高细胞学制片质量，使宫颈癌筛查的检出率和准确率明显提高。本产品可用于宫颈细胞、胸水、腹水、尿和痰等人体标本的涂片和染色。 【检验原理】 本产品通过自由沉降的原理，使细胞分布均匀、单层、贴附牢固且无固缩，细胞数量充足，充分去除黏液、红细胞和其他杂质，制片面积符合国际推荐标准。 【主要组成成份】 名 称 提 供 量 备注 100人份 200人份 细胞固定保存液 10ml/瓶×100 10ml/瓶×200 细胞固定保存液 15ml/瓶×100 15ml/瓶×200 用于痰细胞标本 细胞贴附剂(浓缩液) 1ml 2ml 梯度离心液 220ml×2 220ml×4 痰液稀释液 220ml 220ml×2 用于痰细胞标本，冷藏于4 缓冲液粉 0.2g×6 0.2g×10 苏木素染色液 75ml 75ml×2 EA/OG染色液 75ml 75ml×2 离心管 100个 200个 吸嘴(1ml、5ml) 各100个 各200个 染色槽 100个 200个 载玻片/盖玻片 100个 200个 【客户自备仪器和试剂】 1．低速水平式离心机 4．载玻片架及试管架 7．无水乙醇 2．光学显微镜 5．定时器 8．异丙醇 3．移液加样器 6．量筒 9．去离子水或蒸馏水 【试剂配制】 1．缓冲液： 将0.2g缓冲液粉加入200ml去离子水或蒸馏水，充分混匀。保存于15-30℃，有效 2．细胞贴附剂： ? 取1份细胞贴附剂浓缩液加入9份去离子水或蒸馏水，配成细胞贴附剂。冷藏于4℃，有效期为 3. 冲洗液 取无水乙醇和异丙醇按1：1混匀即可。 【玻片处理】在干净无油的载玻片上，滴上细胞贴附剂，室温下自然晾干。 【细胞标本采集】 宫颈细胞 用一次性宫颈刷采集宫颈细胞标本：大拇指和食指捏住刷柄，将宫颈刷尖伸入宫颈口内朝一个方向旋转3－5周，抽出宫颈刷，卸下刷头放入装有10ml固定保存液的小瓶中（如果病人宫颈上的粘液或分泌物较多时，应先用棉球擦拭后再采样）。瓶签上注明病人姓名、年龄和门诊（住院）号。 痰细胞 病人先清除口内唾液、咽喉分泌物和食物残渣，再从肺部深处用力咳出痰液至本公司提供的细胞保存液瓶内，旋紧瓶盖，颠倒混匀。瓶签上注明病人姓名、年龄和门诊（住院）号。 如条件允许，请使用雾化生理盐水吸入促进排痰。 胸腹水、 尿液 取病人的胸腹水或尿液标本室温静置半小时，使细胞自然沉降。从瓶底吸取10-50ml液体，2000转/分，离心4分钟，如液体含血较多，则离心液可分成三层，此时吸取第二层液体（清亮液体与血液交界处）；如离心后血液很少，则迅速倒掉清亮液体，再将离心管竖立，待管壁液体自然回流至管底部后，混匀，并吸入保存液中。瓶签上注明病人姓名、年龄和门诊（住院）号。 【操作步骤】 1．振荡细胞固定保存液：a.宫颈和胸腹水、尿液细胞标本：小瓶底部接触振荡器皿，振荡15秒；b.痰细胞标本:在已采样的保存液中加入痰液稀释液2-4ml，混匀后放置30分，将小瓶底部接触振荡器皿，振荡15秒 。 2．梯度离心：离心管中加入4ml梯度离心液，再取振荡后的细胞固定保存液8ml加入管中(痰细胞处理液经过滤加入)，1080转/分，离心2分钟。用吸管吸弃上部液体8ml，2000转/分，离心10分钟。取出离心管迅速倒掉上清液。(如为痰细胞，再加2ml缓冲液震荡30秒，静置10分钟后短暂离心，迅速倒掉上清液）。 3．混匀沉淀细胞：离心管中加入500-800ul缓冲液在振荡器上振荡15±5秒。 4．制片：吸取离心管中混匀的细胞悬液300ul移至固定好的染色槽中，槽下为涂有细胞贴附剂的载玻片，静止自然沉淀10分钟，倾去玻片上多余液体，再向染色槽中加500ul冲洗液，30秒后弃之。 5．染色：①染色槽中加500ul苏木素染液，染色60-120秒（痰液和胸腹水60秒），弃之； ②加500ul缓冲液漂洗两次，弃之； ③再加500ul冲洗液漂洗1次，弃之； ④染色槽中加500ul EA/OG染液，染色60-120秒，弃之； ⑤加500ul冲洗液漂洗两次，弃之。 6．封片：从染色板上取下已经染色的玻片，分别浸入冲洗液两次，晾干，用光学树胶、盖玻片封片，镜下观察。 【注意事项】 本品仅用于体外诊断。 宫颈细胞标本采集后，应使采集刷完全浸入保存液中，以使细胞最大限度保留。 制片时如发现细胞量偏少，可适当增加细胞悬液的吸取量。 处理痰液标本时要注意充分稀释和混匀。 采集标本必须保证新鲜，及时固定，以免细胞自溶。