斜生栅藻对农药氯氰菊醋的生物富集研究.PDF

21世纪可持续发展之环境保护 (下卷》 斜生栅藻对农药氯氰菊醋的生物富集研究 熊 丽 吴振斌 中科院水生生物研究所，武汉市 摘 要 本文研究了斜生栅藻对抓氰菊醋农药的生物富集作用。结果表明，斜生姗藻对抓佩 菊醋有很强的富集能力，其 I0d的BCF值为 1017.670同时通过测定抓氛菊醋的正辛醉I 水分配系数 (K_)理论计算其BCF值，二者十分接近。可见，Kow是农药环境安全性评 价研究中的一个必备参数。 关链词:斜生栅藻，抓氰菊酌，生物富集， 正辛醉2水分配系数 查、前 言 拟除虫菊醋类杀虫剂是20世纪80年代崛起的一类高效、安全新型杀虫剂，目前 用量仅次于有机磷类，氨基甲酸醋类，为杀虫剂中的第 3大类，约占世界杀虫剂的 20%10氯氰菊醋 (Cypermethrin)又称灭百可、兴棉宝，是拟除虫菊醋类的广谱性杀 虫剂，为一种神经轴突毒剂，适用于棉花、水稻、蔬菜、果树和茶叶等多种作物上害 虫的防治[21。施于环境中的农药，不仅作用于靶生物以防治病害，而且对非靶生物 也产生影响，从而导致生态系统结构改变，功能破坏[3,41氯氰菊醋对光、热稳定， 在环境中不易自然降解。大量研究表明，藻类对农药等有机污染物有较强的富集和降 解能力[5.61。本研究选择常见的淡水浮游藻类斜生栅藻 (ScenedesmusobliquusKutz) 为实验生物，研究其在纯培养的条件下对氯氰菊醋的生物富集和降解性，为发展生物 降解理论和农药废水生物处理应用等寻求科学依据，同时为国家制定水质标准提供参 考。 贰、材料与方法 一、实验材料和化学药品 斜生栅藻 (ScenedesmusobliquusKiitz)由中国科学院水生生物研究所淡水藻种库 提供，编号FACHB390氯氰菊醋为白色晶体，纯度为96.4%，由湖北省农业科学研究院 国家农药检测中心提供。 21世纪可持续发展之环境保护 (下卷) 二、实验步骤及方法 1,驯化培养 斜生栅藻在无菌条件下转移至水生4号((HB一4)人工培养液中(71，培养至对数生长 期进一步扩大培养。培养条件为:温度25^28CcpH7-8;荧光灯，光暗比12h:12h, 光强为3000lux左右;静止培养，每天定时人工摇动3次。 2、毒性实验 在进行富集和降解实验前，先采用有毒化学品对藻类毒性实验的标准方法，研究 确定氯氰菊醋抑制斜生栅藻生长的96h半效应浓度 (96h一EC3o)为112.81mg/L。这 为富集和降解实验中氯氰菊醋初始浓度的确定提供了依据。富集实验所用的斜生栅藻 藻种都经过培养基中初始100mg/L氯氛菊醋存在下10d以上的驯化。 3.氯氰菊醋的高效液相色谱 H〔PLC)的分析测定 有机污染物在藻类培养中，最终的归宿有4个:(1)培养基中残留:(2)藻细胞 富集;(3)器皿壁吸附;(4)完全降解为C02十H2O。为定量测定抓氛菊醋在培养系统 中的含量，在样品处理中，分别对培养基、细胞体及瓶壁用丙酮进行清洗，抽提，具 体方法如下: (1)培养基处理 取藻液20mL,3000rpm离心5min，沉淀部分待用，取上清液lOmL，加苯5mL在 振荡器上充分振荡lmin萃取，静止分层，有机相经。.1Nm滤膜过滤，再用无水硫酸钠 干燥，于K一D浓缩器上浓缩至千，加1ML乙睛，得待测样品。 (2)藻细胞样品处理 取上述藻细胞，在低温冰箱中反复冻融4^-5次，并用超声波破碎30s，加人苯5mL 充分抽提，离心 lOmin，上清用无水硫酸钠干燥，经0.1Im滤膜过滤并浓缩至干，加 ImL乙睛，得待测样品。 (3)瓶壁清洗 除去藻及培养基，双蒸水清洗瓶壁2-3次，加人苯lOmL，超声波清洗5min，经 0.1Nm滤膜过滤，无水硫酸钠干燥并浓缩至干，加1ML乙睛，得待测样品。 4〔)HPLC检测条件 Waters600一Ms型高效液相色谱仪，Waters490一Ms多波长