中国农业大学考博基因工程.docVIP

一、名词解释： 2μ环：大多数酵母菌株含有一种DNA的自主复制环，称为2μ环或2μmDNA。这种酵母质粒接近2μm长，约6300bp，在每细胞的酵母核浆中约50－100个拷贝，2μ环DNA是以核小体的形式存在，它还具有两种“REP”功能，以保证拷贝数在细胞中的稳定性。 DNA指纹：1985年Jefferys等人发现同一家族的小卫星重复单位含有相同或相似的核心序列，于是用某一小卫星做探针，可以同时与同一物种或不同物种的众多酶切基因组DNA片段杂交，获得具有高度特异性的杂交图谱，其特异性象人的指纹一样因人而异，故称为DNA　fingerprint。 HAT选择：Hybrid Arrested Translation 。杂交抑制的转译选择。在体外无细胞的转译体系中，mRNA一旦同DNA分子杂交之后，就不再能够指导蛋白质多肽的合成。选择有利于形成DNA－RNA杂种分子，但不利于形成DNA－DNA杂种分子，同时又能阻止线性质粒DNA再环化的反应条件，将从转化的大肠杆菌菌落群体或重组菌体群体中制备来的带有目的基因的重组质粒DNA omiga因子：有时还可以看到与RNA聚合酶相结合的一个很小的蛋白质（10Kda），叫W亚基，其功能还不清楚，也有人认为，W亚基对于RNA聚合酶的结构和功能没有太大的影响（目前，还发现E.coliRNA聚合酶另一重要亚基NasA） PCR：聚合酶链式反应，首选是双链DNA分子在临近沸点下加热时便会分离成两条单链的DNA分子，然后DNA聚合酶以单链DNA为模板，以一对寡聚核苷酸为引物，并利用反应混合物中的四种脱氧核苷二磷酸（dNTPs）合成新生的DNA互补链。经过高温变性，低温退火和适温延长等三个步骤组成的温度循环周期的多次重复PCR反应使特定的DNA区段得到迅速大量的扩增，其特点表现在：（1）指导特定的DNA序列的合成，（2）使特定的DNA区段得到迅速大量的扩增。 T－DNA：整合在植物细胞核基因组上的决定植物形成冠瘿瘤的T－区段为T－DNA或转移DNA。它只存在于植物细胞核中，为Ti质粒DNA总长度的10%左右，而且已知植物冠瘿瘤细胞中冠瘿碱的合成和不依赖于植物激素的生长能力，都是由编码T－DNA上的基因控制。 Ti质粒：存在于根瘤土壤杆菌细胞中的一种大型的DNA质粒，它控制根瘤的形成。Ti是英文（Tumor-inducing）的略语。Ti质粒现已改造成为植物基因工程的最重要的载体系列。 YAC：Yeast artificial chromosome,它是利用酵母染色体的着丝粒和端粒元件，人工构成的能够在酵母细胞中增殖并能转移到哺乳动物细胞的遗传元件。这类载体能够将200－1000kb上的DNA遗传物质导入寄主细胞，YAC现已被用来研究大的遗传座位，例如人11号染色体的β－球蛋白区段的生理调节作用。 染色体步测：chromosome walking，一种用来鉴定一系列彼此重叠的DNA片段的分子生物技术，通常被用来测定在DNA大分子中各个基因的相关位置。 粘性末端：cohesive ends或sticky ends：酶切位点在两条DNA单链上不同，（对称）酶切后形成的具有互补碱基的单链末端结构，酶切产生的两个粘性末端很容易通过互补碱基的配对而重新连接起来。 平末端Blunt end：酶切位点在两条DNA单链上相同，酶切后形成平齐的末端结构，这种末端不易重新连接起来。 溶源现象：噬菌体感染细菌后并不马上复制引起寄主裂解，而是将自身的DNA整合在寄主染色体上，随寄主染色体一起复制，这种现象称为溶源现象。 转导：transduction，以病毒为载体（对细菌而言是噬菌体）把遗传物质从一种细胞转移到另一种细胞的过程。 转染：transfection,(1)应用从病毒或病毒载体中分离的DNA或RNA感染细胞的过程（2）真核细胞捕获外源DNA并通过参入作用而获得新的遗传信息的过程。 转化：transfomation,（1）细菌的转化指细菌捕获游离DNA，并使此DNA编码的遗传信息导入细菌染色体中成为永久性遗传组成部分。（2）正常的真核细胞由于受到致瘤病毒的感染而转变成恶性细胞的过程也叫转化。（3）目前认为，凡外源DNA导入细胞的过程都可以称为转化。自然条件下的转化只发生在细菌生长的一个特殊阶段,称为感受态(Competence)。在这一阶段,它们能够吸收外源分子。 同裂酶：能识别和切割同样的核苷酸靶序列的不同内切酶。同裂酶产生同样的切割，形成同样的末端。有一些同裂酶对于切割位点上的甲基化碱基的敏感性有所差别，故可用以研究DNA甲基化作用。 同尾酶：isocandamers, 识别的靶序列不同，但能产生相同的粘性末端的一组限制性内切酶。 同位酶：isoschizomer,识别位点相同的一组限制性内切酶，所产生的粘性末端不一定相