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PCR技术复习 【教学目标】 （一）认知目标 1、了解PCR技术的基本操作步骤。 2、理解PCR的原理。 3、讨论PCR技术在生产生活中的应用。 （二）能力目标 1、通过多聚酶链式反应扩增DNA片段，锻炼学生实际动手能力。 2、通过严格控制温度等反应条件，培养周密的思维能力。 （三）情感、态度与价值观目标 1、 通过对PCR实验的操作及结果分析，培养学生严谨的科学态度和实事求是的科研精神。 2、 通过对生物高新技术的接触，加深学生对实验科学的热爱。 【课题重点】 PCR的原理和PCR的基本操作。 【课题难点】 PCR的原理 【教学方法】 启发式教学 【教学工具】 多媒体课件 【教学过程】 复习DNA复制过程引入 解旋：解旋酶、ATP，DNA两条链打开，，形成两条DNA单链。 引物结合：在DNA单链3’端与DNA反向配对结合，确保引物3’端与DNA单链准确配对。 DNA聚合酶结合。 子链合成：DNA聚合酶从引物3’端开始，将配对的脱氧核苷酸连接起来。 后续加工：DNA聚合酶I将引物切去，并合成空缺处的DNA单链，再由DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来（半不连续合成。先导链，滞后链） 子链合成特点：不能从头合成；合成方向为“5’→3’合成”。 （二）复习教学 1．基础知识 PCR技术扩增DNA的原理 教师引导学生归纳DNA体外扩增需要的条件： 解开螺旋：在80～100℃时，DNA双螺旋打开，形成两条DNA单链，称为变性。 恢复螺旋：在50℃左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为复性。 复制条件：缓冲液,DNA模板,四种脱氧核苷酸,热稳定DNA聚合酶,两种引物。 反应场所：PCR仪。 4．PCR的反应过程 变性：在95℃时DNA解旋 复性：在50℃时引物与DNA单链结合 延伸：在72℃时合成DNA子链（两个引物间的序列） 展示PCR原理示意图，梳理清晰： ? （三）课堂练习、总结、点评 植物组织培养技术复习 教 学 目 标 知识与能力 理解植物组织培养的基本原理，理解细胞分化的概念以及离体植物细胞的脱分化和再分化，熟悉植物组织培养的基本技术，基本过程并进一步形成网络化的知识结构。 过程与方法 提高学生对信息的收集处理及对问题的探究能力。 情感、态度与价值观 认同科学技术，生物学科学发展的前景，科学探究能力等科学素养的培养，通过讨论植物组织培养技术再生产实践中的应用，帮助学生确立理论联系实际的观点。 教学 重点 理解植物组织培养的基本原理，尝试植物组织培养。 教学 难点 熟练掌握植物组织培养的基本技术 教学 方法 讲授法 练习法 教学过程 一、植物组织培养 概念：在无菌和人工控制的条件下，诱导离体的植物器官、组织等在适宜的培养条件下发育成完整植株的技术。 原理：植物细胞的全能性。 天竺葵的组织培养 器具准备：高压蒸汽灭菌锅，接种工具，培养设备，化学实验及分析设备 试剂准备：MS基本培养基储备液，漂白粉或次氯酸钠，2,4-D，NAA，6-BA等 配置：按表的标准分别取4种储备液，加入2000ML烧杯中，再称取蔗糖30g，琼脂8g加入烧杯，加蒸馏水定容至1000ML，加热煮沸至琼脂完全溶解，用质量分数为10%的NaOH溶液调节PH至5.6-5.8，即成了MS基本培养基。 灭菌：高压蒸汽灭菌 取材与接种 观察与记录：每天观察外植体的生长情况，记录愈伤组织大小、质地、颜色等情况。 转接培养 露地栽培：组织培养得到的试管苗在移栽露天大田之前，一般要经过炼苗，使其更好地进行光合作用，并逐渐适应自然环境下的生长条件。 二、“点拨拓展”： 1、MS基本培养基：MS HYPERLINK /view/72787.htm \t _blank 培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是 HYPERLINK /view/151020.htm \t _blank 无机盐和离子浓度较高，是较稳定的 HYPERLINK /view/1956293.htm \t _blank 离子平衡溶液，它的 HYPERLINK /view/84021.htm \t _blank 硝酸盐含量高，其 HYPERLINK /view/1449929.htm \t _blank 养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要，因而适用范围比较广，多数 HYPERLINK /view/157870.htm \t _blank 植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的 HYPERLINK /view/1135673.htm \t _blank 基本培养基。 基于此，这种 HYPERLINK /view/72787.htm \t _blank 培养基就用他们的名字来命名了。 2、炼苗： HYPERLINK /view/352925.