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PCR实验室常用设备、试剂和耗材使用管理 广西临床检验中心 周微雅 2012.05.15 常用仪器设备 试剂准备区 加样器 洁净工作台 低温冰箱 标本制备区 生物安全柜 高速( 冷冻)离心机 漩涡振荡混旋器 恒温水浴箱（金属浴） 加样器 冰箱 扩增区（产物扩增及分析区） PCR热循环仪（DNA扩增仪） 冰箱 1、现在使用的冰箱的温度是否标示范围内？ 2、需要每天都记录温度吗？ 冰箱 冰箱 温度计 1、新购买的温度计准确吗？ 2、需要做质检吗？ 3、如何做质检？ 温度计 温度计 天平 一、分类 1、超微量电子分析天平 2-5g 2、微量电子分析天平 20-50g 3、准微量电子分析天平 20-100g 4、常量电子分析天平 100-200g 5、精密电子分析天平 天平 天平 天平 二、影响重现性的因素 1、潮湿 2、静电：最好用100%的玻璃容器。 3、空气浮力 4、温度 5、气流和通风 6、磁场和磁性样品 7、天平放置状态 天平 三、维护 1、避免振动。 2、在密闭容器内称量挥发性和腐蚀性物品。 3、定时清洁。 4、避免移动仪器。 5、及时检修，不可带“病”工作。 6、不可过载，损坏天平。 加样器 放置地点： 试剂准备区 标本制备区 标识： 所在区域 校准状态 加样器-类型 单道连续可调式移液器 多通道连续可调式移液器 单道连续移液器 单道移液管配合使用的移液器 加样器-使用 加样器-型号和取液范围 型号 所用量程范围（μL） GILSON eppendorf P10 0.5 -10 0.5 -10 P20 2 -20 2 -20 P100 20 -100 10 -100 P200 20 -200 20 -200 P1000 200 -1000 100 -1000 加样器-技术指标 加样器-使用 加样器-使用 加样器-使用 吸液 前进式 倒退式 加样器-使用 把按钮压至第一停点垂直握持 加样器，使吸嘴浸入液样中， 浸入液体深度视型号而定： P2和P10 ≤1mm P20和P100 2-3mm P200和P1000 2-4mm P5000 3-6mm P10ML 5-7mm 加样器-使用 放液 　将吸头口贴到容器内壁并保持10－40℃倾斜，缓慢平稳地把按钮压到第1停点，等1s后将吸头压至第二点排出剩余液体，压住按钮，同时提起加样器，使吸头贴管壁擦过，松开按钮，按吸头弹射器去除吸头。 加样器-使用注意事项 根据所需取液量选择 相应的移液器及吸头， 基因扩增实验要求使 用带滤芯的吸头，防 止交叉污染。 吸取液体时应缓慢匀速吸取，避免液体溅到移液器头上；打出液体后拇指应缓慢松开按钮，避免液体回吸。 在调整取液量的旋钮时，不要用力过猛，并应注意计数器显示的数值不要超过其可调范围。 连续可调式移液器不可在无吸头时使用，吸头有液体时不可平放或倒置。 加样器-使用注意事项 操作时要慢和稳，吸嘴浸入液体 深度要合适，吸液过程深度尽量保持不变 改吸不同液体、样品或试剂前更换新吸嘴 发现吸嘴内有残液时必须更换；新吸嘴使用前应先质检。 为防止液体进入移液器套筒内，注意以下几点：压放按钮时保持平稳；移液器不得倒转； 使用了酸或有腐蚀蒸气的溶液后，最好拆下套筒，用蒸馏水清洗活塞及密封圈。 加样器-使用注意事项 连续可调式移液器在取样加样过 程中应注意移液嘴不能触及其他 物品，以免被污染； 移液嘴盒（架子）、废液瓶、所取试剂及加样的样品管应摆放合理，以方便操作过程、避免污染为原则。 连续可调式移液器在使用完毕后应置于以液器架上，远离潮湿及腐蚀性物质。 在取液之前，所取液体应在室温（15-25?C）平衡；液体温度与室温有异时，将吸嘴预洗多次再用；移液温度不得超过70℃。 不可把容量计数调超其适用范围。 加样不准确的原因 用大量程的移液器移取小体积的液体 装配吸头时气密性不好，吸头不匹配 吸取的液体具有强挥发性 液体的密度与水有明显差异 吸液速度和放液速度太快 加样器-维护及校准 维护 1．一般维护可用中性洗涤剂（如洗餐具用的洗涤灵），或者用异丙醇清洁。然后用蒸馏水反复洗涤，去除洗涤剂或异丙醇，晾干。清洁后活塞处可使用一定量的润滑剂。 2．如果有液体进入加样器内的严重污染，