04_基因工程的主要技术及其原理.ppt

一、琼脂糖凝胶电泳 染色 主要有溴化乙锭（ethidium bromide, EB）染色法和SYBR Gold染色法。 然后，核酸分子在紫外光下发出荧光，肉眼能看到约50ng DNA所形成的条带。 一、琼脂糖凝胶电泳 染色-凝胶的EB染色 注意事项 EB被认为是一种强致癌物质 EB可用来检测单链或双链核酸 EB使用时的配制、贮存及使用 EB常用水配制成10 mg/ml的贮存液，于室温保存在棕色瓶或用铝箔包裹的瓶中，使用终浓度为0.5 μg/ml 。 当要知道DNA片段准确大小时，凝胶应在无EB情况下电泳，电泳结束后再用EB染色。 一、琼脂糖凝胶电泳 染色-凝胶SYBR Gold的染色 SYBR Gold是一种新型极敏感染料的商品名称。其与DNA结合的亲和力高，并且结合后，能够极大增强荧光信号。 一、琼脂糖凝胶电泳 电泳的基本原理 一种分子被放置到电场中，它就会以一定的速度移向适当的电极。它与电场强度和电泳分子本身所携带的净电荷数成正比。就是说，电场强度越大，电泳分子所携带的净电荷数量越多,其迁移的速度越快,反之则较慢。 电泳分子在电场作用下的迁移速度，叫做电泳迁移率。 一、琼脂糖凝胶电泳 电泳的基本原理 DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA