课件：色谱法分离原理.ppt

因此，混合物中某一组分的百分含量并不等于该组分的峰面积在各组分峰面积总和中所占的百分率。这样，就不能直接利用峰面积计算物质的含量。为了使峰面积能真实反映出物质的质量，就要对峰面积进行校正，即在定量计算是引入校正因子。 校正因子分为绝对校正因子和相对校正因子。 fi = mi / Ai 式中fi值与组分i质量绝对值成正比，所以称为绝对校正因子。在定量分析时要精确求出fi值是比较困难的。 一方面由于精确测量绝对进样量困难； 另一方面峰面积与色谱条件有关，要保持测定fi值时的色谱条件相同，既不可能又不方便。另外即便能够得到准确的fi值，也由于没有统一的标准而无法直接应用。为此提出相对校正因子的概念来解决色谱定量分析中的计算问题。 1. 相对校正因子 相对校正因子定义为 fi? = fi / fs 即某组分i的相对校正因子fi?为组分i与标准物质s的绝对校正因子之比。 fi? =（mi /Ai）/（ms/As） =（mi / ms）?（As / Ai ） 可见，相对校正因子fi?就是当组分i的质量与标准物质s相等时，标准物质的峰面积是组分i峰面积的倍数。若某组分质量为mi ，峰面积Ai ，则fi? Ai的数值与质量为mi的标准物质的峰面积相等。也就是说，通过相对校正因子，可以把各个组分的峰面积分别换算成与其质量相等的标准物质的峰面积，于是比较标准就统一了。这就是归一法求算各组分百分含量的基础。 2. 相对校正因子的表示方法 上面介绍的相对校正因子中组分和标准物质都是以质量表示的，故又称为相对质量校正因子；若以摩尔为单位，相对摩尔校正因子；另外相对校正因子的倒数还可定义为相对响应值S?（分别为相对质量响应值Sw?、相对摩尔响应值SN?）。通常所指的校正因子都是相对校正因子。 3.相对校正因子的测定方法 相对校正因子值只与被测物和标准物以及检测器的类型有关，而与操作条件无关。因此， fi? 值可自文献中查出引用。若文献中查不到所需的fi? 值，也可以自己测定。常用的标准物质，对热导检测器（TCD）是苯，对氢焰检测器（FID）是正庚烷。 测定相对校正因子最好是用色谱纯试剂。若无纯品，也要确知该物质的百分含量。测定时首先准确称量标准物质和待测物，然后将它们混合均匀进样，分别测出其峰面积，再进行计算。 （三）定量计算方法 1. 归一化法 把所有出峰组分的含量之和按100%计的定量方法称为归一化法。其计算公式如下： Pi % = (mi / m) ? 100% = Aif?i / (A1f?1 + A2f?2 + ?+Anf?n) ? 100% 式中Pi %为被测组分i的百分含量； A1、A2 ? An为组分1 ~ n的峰面积；f?1、f?2 ? f?n为组分1 ~ n的相对校正因子。 当f?i 为质量相对校正因子时，得到质量百分数；当f?i 为摩尔相对校正因子时，得到摩尔百分数。 归一化法的优点是简单、准确，操作条件变化时对定量结果影响不大。但此法在实际工作中仍有一些限制，比如，样品的所有组分必须全部流出，且出峰。某些不需要定量的组分也必须测出其峰面积及f?i 值。此外，测量低含量尤其是微量杂质时，误差较大。 2. 内标法 当样品各组分不能全部从色谱柱流出，或有些组分在检测器上无信号，或只需对样品中某几个出现色谱峰的组分进行定量时可采用内标法。 所谓内标法，是将一定量的纯物质作为内标物加入到准确称量的试样中，根据试样和内标物的质量以及被测组分和内标物的峰面积可求出被测组分的含量。 由于被测组分与内标物质量之比等于峰面积之比，即 mi / ms =Aif?i / Asf?s 所以 mi = ms Aif?i / Asf?s 式中下标s代表内标物，i代表组分。若试样质量为m，则 Pi % = (mi / m) ? 100% = ms Aif?i / Asf?sm ? 100% 内标法的关键是选择合适的内标物，它必须符合下列条件： （1）内标物应是试样中原来不存在