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第八章 特种实验动物;三 常用免疫缺陷动物的生物学特征 ; 应用： （一）在微生物学方面 感染麻风杆菌裸小鼠的病理组织学特征与人的结节性麻风非常相似。 （二）在免疫学方面 有人用BALB/c品系的裸小鼠制备单克隆抗体。 （三）在寄生虫学方面 胸腔内接种卡氏肺囊虫，能成功复制出卡氏肺囊虫疾病模型。 （四）在遗传学方面 裸小鼠因遗传背景的不同，所表现的细胞免疫反应和实验室检查指标也不同。 ; 三、性连锁免疫缺陷小鼠 (X-linked immune deficiency mouse XID)起源于CBA/N品系。B细胞功能缺陷，基因符号xid，位于X性染色体上。纯合子雌鼠（xid/xid）和杂合子雄鼠（xid/Y）对非胸腺依赖性Ⅱ型抗原没有体液免疫反应，是研究B淋巴细胞的发生、功能与异质性理想动物。; 五、严重联合免疫缺陷小鼠 SCID小鼠（severe combined immunodeficient mice）在1983年由美国学者Bosma首先发现于C.B-17近交系小鼠，是位于第16号染色体的称之为scid的单个隐性突变基因所导致。 SCID小鼠在高度洁净的SPF条件下存活1年左右.;*;1982年，Richard Palmiter 和 Ralph Brinster 领导的研究小组将大鼠的生长激素基因，显微注射到小鼠胚胎中，从而培育出了世界上第一批转基因小鼠。;Gordon（1980）等采用原核显微注射法获得了第一例转基因小鼠。 Palmiter（1982）等采用显微注射法将带有小鼠mMt启动子的大鼠生长激素基因注入小鼠的受精卵中，获得“超级小鼠”，引起巨大轰动。;一、转基因动物的研究历史 1、1960年代，将外源基因导入鸡的卵巢和睾丸，得到性状改变的鸡，估计是转基因鸡。 2、1974年，美国珍尼斯首次用显微注射法获得体细胞有SV40病毒DNA的小鼠。 3、1980年，戈登完善了显微注射技术。;4、1982年，帕尔米特将大鼠生长激素基因结构区融合在SM（金属巯蛋白基因（MT）启动子）中，注射到小鼠受精卵雄性原核内，获得体型似大鼠的转基因小鼠。 5、1985年，英国拉尔夫布林斯特研制出能生成人类生长激素的转基因猪。 6、1989年，意大利拉维特拉纳运用精子载体法转移外源性DNA，获得PSV2—CAT转基因小鼠。;7、我国1980年代开始转基因动物研究，成功研制出转基因牛、小鼠、猪、羊、兔、金鱼。;*;（二）转基因动物命名 转基因的命名遵循以下原则： 符号：一个转基因符号由以下三部分组成，均以罗马字体表示： TgX （YYYYYY）# # # # # Zzz， 其中各部分符号表示含意为： TgX = 方式（mode） （YYYYYY）= 插入片段标示（insert designation） # # # # # = 实验室指定序号 （laboratory-assigned number）及 Zzz = 实验室注册代号(laboratory code) ; 例如:C57BL/6J-TgN（CD8Ge）23Jwg 是来源于美国杰克逊研究所（J）的C57BL/6品系小鼠被转入人的CD8基因组（Ge）；转基因在JonW.Gordon(Jwg)实验室完成，获取于一系列显微注射后得到的序号为23的小鼠。 根据转基因动物命名的原则，如果转基因动物的遗传背景是由不同的近交系或远交群之间混合而成时，则该转基因符号应不使用动物品系或种群的名称。 转基因符号可以缩写，即去掉插入片断标示部份，例如TgN（GPDHIm）1Bir 可缩写为TgN 1 Bir 。一般在文章中第一次出现时使用全称，以后再出现时可使用缩写名称。 ;三、制备转基因动物的方法; 超数排卵母鼠 公 鼠; 取 卵 ;体视显微镜;（二）反转录病毒感染法 将外源基因DNA插入逆转录病 毒载体；通过辅助细胞包装成病毒颗粒，感染胚胎；再将感染的桑椹期胚胎导入子宫。 ;（三）胚胎干细胞法 （1）获取胚胎干细胞（ES细胞）； （2）将外源基因导入ES细胞； （3）获取囊胚期胚胎； （4）将含有外源基因的ES细胞注入囊胚期胚胎的腔内； （5）将其移植到假孕动物子宫。;（四）电脉冲法 利用外界高电压短脉冲使细胞膜产生可逆性穿孔，外源性DNA通过此孔可进入细胞。 （五）精子载体导入法 以精子作为外源性DNA的载体，通过受精作用将外源性DNA导入受精卵。;四、转基因动物的进展;广空458