沉淀方法课 件教案.pptVIP

第四章 分离纯化常用技术、原理及方法;一、沉淀法分离蛋白质;在蛋白质溶液中加入大量中性盐，以破坏蛋白质的胶体性质，使蛋白质从溶液中沉淀析出，称为盐析。; 2. salting out – proteins are also less soluble at salt concentrations (high ionic strength) because the salt ions bind most of the water molecules ; 常用的中性盐有：硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等。 盐析沉淀蛋白质时，通常不会引起蛋白质的变性。;;;;分段盐析;脱盐: desalting process dialysis;透析示意图;;Simple figures to dialysis;与水互溶的极性有机溶剂如甲醇、乙醇、丙酮等能使蛋白质在水中的溶解度显著降低。 有机溶剂引起蛋白质变性的原因有两个： 降低水的介电常数，使蛋白质分子表面可解离基团的离子化程度减弱，水化程度降低，促进了蛋白质分子的聚集沉淀。 是极性有机溶剂与蛋白质争夺水化水，而使蛋白质分子沉淀。;凡能与水以任意比例混合的有机溶剂，如乙醇、甲醇、丙酮等，均可用于沉淀蛋白质。 ;; 不同的蛋白质由于水化层厚度不同，发生沉淀需要的有